小中大请教各位,看了园里的帖子总结了下测蛋白浓度的目的基本上是为了保持上样量的一致,而且可以知道上样量的多少。但是有如下问题想请教下:
1:上样量一致得出的结果应该是直接比较的,但是测蛋白浓度后还是有很多的步骤的,比如煮沸就会改变蛋白浓度,还有放置时间问题,这样的话测出的结果是和总蛋白浓度比较比较可靠呢还是和内参比较比较可靠呢?有的说两个都可以,但是我做出来的结果并不是很一致又该怎么办呢?
2:我看到很多文献里包括国外的有关WB的实验中并没有测蛋白浓度这一项呢,是大家都默认不写还是什么原因,既然不写也可以是不是大家都默认和内参比较的结果比较可靠?
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虽然都没写蛋白浓度,但其实基本上都测过。但理论上测过并且上样量一样,也不保证结果完全一致,最可靠的做法,应该是在保证上样量一样的情况下(上样的总蛋白量),然后用目标蛋白与内参蛋白条带的灰度值比较作为变化情况来观察结果。