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标题:【求助】去高丰度蛋白

bling[使用道具]
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【求助】去高丰度蛋白

请问:血清蛋白去高丰度哪种方法最好?你们能不能告诉我multiple affinity removal columns (MARC)的操作流程?
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kuaizige[使用道具]
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能大概说一下你的试验目的吗? 因为去除高峰度蛋白的方法和商品有很多种,去除的原理都差不多,但选择哪种产品要看具体的试验目的。
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ending[使用道具]
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去初血清蛋白中的高丰度蛋白,推荐使用:
一、Free flow electrophoresis
二、Kit
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kuaizige[使用道具]
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Free flow electrophoresis 目前国内除了生物物理所外哪里还有呢?
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FFE原来在生物物理所有呀,我们实验组将来有买这个仪器的可能.
上次BD公司专门来我们学院讲这个呢,听他们讲起来这个仪器实在太棒了.
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131415[使用道具]
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听完FFE的讲座,不知道价格如何

感觉就是一个大的ZOOM胶

自己做血浆的去高丰度,用的是AGILENT的去6种高丰度的柱子

效果一般,最近他们推出去14种蛋白的柱子,估计效果也好不到哪里去

白蛋白怎么都去不干净

楼主请讲明试验目的,否则费钱费力
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bling[使用道具]
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Free flow electrophoresis去血清高丰度效果到底怎么样?那些研究所有这个系统.
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国外用multiple affinity removal columns (MARC)的比较多,一般可以去除6种高丰度蛋白,有人使用过吗?它的操作流程?
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那你能告诉我采取什么方法来去出高丰度呢?
我的实验目的是寻找差异蛋白质,从而探讨该差异蛋白质的功能,对疾病的损伤修复机理。
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fsdd817[使用道具]
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你的实验目的很大,我其实具体想问的是你的下一步处理所走的路线。

我认为,如果你走2D-Gel的路线,那么找个公司的kit去除IgG和HSA就行了。

如果你对HPLC分离比较熟悉,再加上实验室很有钱的话当然可以考虑买个去高丰度的柱子了。

我要提醒你的是,一般来说去除的种类越多,丢失的非高丰度蛋白也就越多,另外肯定不能完全去除干净。特别要注意的就是在你去除完高丰度后下一步对样品量的需求。

我们实验室有3种去除高丰度的柱子,还有两三种kit,但我是做糖蛋白的所以我一般只用GE的Protein G的小柱把IgG去掉。

关于柱子的具体的用法你应该可以到公司的网站上查到,或者打电话和他们的技术支持直接咨询。比如 Agilent,GenWay的柱子,Biorad, Pall, 等等公司的Kit。
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