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标题:【求助】Odyssey双色红外激光成像系统

30moonriver[使用道具]
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发表于 2013-6-3 15:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】Odyssey双色红外激光成像系统


请问各位同行，Odyssey双色红外激光成像系统做western条件如何，如一抗时间，二抗时间等。为什么我用DAB底物显色能做出来而改用Odyssey双色红外激光成像系统却看不到条带呢？请各位大虾不吝赐教，谢谢！
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BUK[使用道具]
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发表于 2013-6-3 15:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不知道你用的二抗是什么？odyssey要用特殊的荧光二抗。其他没有什么特殊的。检测灵敏度应该比DAB要高，应该不会检测不到的。
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04906[使用道具]
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发表于 2013-6-3 16:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

odyssey的荧光二抗建议用仪器厂家配套的.
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98776langtao[使用道具]
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发表于 2013-6-3 16:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这位战友：
既然你用DAB底物显色能做出来,所以不是你技术的问题。
可能是仪器使用的问题，不知你注意没，在扫膜界面有700，800，旁边各自有一个可选对话框
你把扫描的数值选大点，一般是2.0，如果不出，改大了试一试，比如4.0
goog luck！
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30moonriver[使用道具]
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发表于 2013-6-3 16:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
谢谢各位的建议，我用的是基因公司的专用荧光二抗。
我也检测过每一步可能出现的问题，发现都是OK的。
下次我改用大的数值扫描试试。
再次感谢！
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30moonriver[使用道具]
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发表于 2013-6-3 16:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

改了条件还是没有结果，我是照基因公司的protocol 做的，与DAB底物显色体系略微有些差别，请问哪位战友能把你们用odyssey做western的protocol发给我看看，万分感谢！
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8princess8[使用道具]
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发表于 2013-6-3 16:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

是的 好像是要建议用厂家的二抗
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mamamiya[使用道具]
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发表于 2013-6-3 16:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

这个现象在我们实验室也存在，我们认为荧光二抗的灵敏性不行。或者是用底物显色的时候有明显的放大效应，而用荧光二抗则没有。
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