小中大【求助】尿素怎么不溶解?
做双向电泳的,自己配裂解液和上样液,
裂解液配方:
尿素 7M
硫脲 2M
CHAPS 4%
二次水 至20ml
使用前加DTT至65mM,tris至40mM,PMSF至1mM
上样液配方:
尿素 8M
CHAPS 2%
1%溴酚蓝 0.002%
二次水 至10ml
使用前加DTT至18mM,IPG buffer至0.5%
由于都含有尿素,特别难溶解,好像含有尿素的温度不能超过37度,就在磁力搅拌器上一直搅着,发现过了一两个小时还没溶解,怎么回事么?中间还在34度左右水浴锅里水浴过,还是没溶解,溅在烧杯壁上的液体都已经结晶了。
有人碰到这样的问题么,很着急,急求帮助。
1.裂解液和上样液配方有无问题?
2.尿素怎么老不容,有没有什么方法加速其溶解?