液相色谱

以下是我所选的分析条件：

     C18柱，流动相甲醇-0.2%乙酸溶液，梯度洗脱（0-10min，30:70—40:60;10-15min,40:60— 80:10;15-25min,80:10—80:10;25-30min,80:10—30:70，stop T 40min）,流速0.5mL/min,柱温35℃，检测为UV271nm，进样量5μL。

   主要是我想知道我这样梯度洗脱的设置十分合适？对液相仪器有影响吗？

    这是我第一次设计梯度洗脱，（因为我三个预分析的物质出峰相差较远，才选用梯度分析）

谢谢！

建议你设计梯度洗脱前，应该走下0-100%的甲醇，看下你的三个目标物质的洗脱时间和洗脱浓度是什么，然后在来设计你的梯度洗脱，没准你的物质在30%的甲醇下都不保留，或是80%的甲醇浓度也有可能洗脱不小来！

梯度设置对仪器应该没影响的，不合适的设置仪器也应该有自我保护功能，不让你设置的，C18柱不要用水冲的时间过长

只要满足你的分析要求，设置的梯度也就合适了。。

我现在担心的是短时间内浓度变化太剧烈，对基线的波动影响较大，最短的5min变化50，仪器是否有影响？

试下就知道，不会损伤楼主的仪器！！

甲醇水的粘度会随甲醇含量而发生很大变化，柱压也随之改变。

80：10？是80：20吧

条件好不好要用样品来试啊

最好避免剧烈的浓度变化。

不好意思，80:10改成90：10

我想请问楼上的，我现在所选的浓度变化算的上剧烈吗？

走样试下才知道，比例变换太快，基线不好