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标题:【求助】关于蛋白冻干

babybabe[使用道具]
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【求助】关于蛋白冻干


我想冻干白蛋白,可是听说还要有冻干曲线,挺麻烦是吗?
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avi317[使用道具]
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不用吧,我都是直接冻的.冻干曲线是温度和真空度的曲线?请教一下.
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jiushikeshui371[使用道具]
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不大对,在冻干过程中,可把产品和板层的温度、冷凝器温度和真空度等与时间对照划成曲线,叫做冻干曲线。一般以温度为纵坐标,时间为横坐标。冻干不同的产品采用不同的冻干曲线。同一产品使用不同的冻干曲线时,产品的质量也不相同,冻干曲线还与冻干机的性能有关。因此不同的产品,不同的冻干机应用不同的冻干曲线。反映的是一个冻干程序。
而冻干燥的程序大概是这样的:在冻干之前,把需要冻干的产品分装在合适的容器内,一般是玻瓶或安瓶,装量要均匀,蒸发表面尽量大而厚度尽量薄些;然后放入与冻干箱尺寸相适应的金属盘内。装箱之前,先将冻干箱进行空箱降温,然后将产品放入冻干箱内进行预冻,抽真空之前要根据冷凝器冷冻机的降温速度提前使冷凝器工作,抽真空时冷凝器应达到-40℃左右的温度,待真空度达到一定数值后(通常应达到100uHg以上的真空度),即可对箱内产品进行加热。一般加热分两步进行,第一步加温不使产品的温度超过共熔点的温度;待产品内水份基本干完后进行第二步加温,这时可迅速地使产品上升的规定的最高温度。在最高温度保持数小时后,即可结束冻干。
整个升华干燥的时间约12-24小时左右,与产品在每瓶内的装量,总装量,玻璃容器的形状、规格,产品的种类,冻干曲线及机器的性能等等有关。
冻干结束后,要放干燥无菌的空气进入干燥箱,然后尽快地进行加塞封口,以防重新吸收空气中的水份。
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jiushikeshui371[使用道具]
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唉,我们冻干的东东老是水分超标,不知道怎样才能控制在3%以下。真是头痛啊!
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jiushikeshui371[使用道具]
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补充:冻干曲线是有比较强的针对性的,不同的蛋白可能该曲线不同,需要摸索的,尤其是根据你的蛋白结晶情况进行优化。很多的时候,如果冻干不好的话,反而得不到活性蛋白。即使克服了上述问题,复溶的过程也许会是你的蛋白变性。因此针对不同的蛋白需要下工夫摸索的,就这个作好了,非常了不起!水分超标,可能就是开始降温没有控制好,蛋白结晶性不好!
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shenkunjie[使用道具]
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此外水分超标是不是你们的真空泵不好,这样真空度不够,自然水分不合格,建议检修泵。白蛋白其实是比较稳定的,直接冻干没有什么问题吧,此外有赋形剂吗。
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jiushikeshui371[使用道具]
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我们的冻干机刚全面维护过,我想应该不会是机器的问题。
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jiushikeshui371[使用道具]
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不知一般开始阶段降温的速率大概该是多少?
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那你们别的样品合格水分合格吗,我觉得你不妨也做个别的样品试试,这样好知道是不是真空度的问题,因为如果泵很好的话,那水分不应该超标的,此外在冷冻干燥的时候最好好液层薄点,一般1cm左右好点,因为这样才干燥充分,液层太厚干燥不充分,那水分也难合格。
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babybabe[使用道具]
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冻干过程中蛋白很容易变性吗?
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