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标题:[已解决]关于手性柱~~~~

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ranran719903[使用道具]
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关于手性柱~~~~

实验室新买了一个正相手性柱,其中柱子硅胶表面涂敷有纤维素-三(3,5-二甲苯基氨基甲酸酯),一般使用的流动相是正己烷跟异丙醇~~
请问实验完成后使用什么流动相冲洗柱子呢??需要冲洗多久?柱子应该保存在异丙醇还是正己烷中呢??
我们现在的流动相一般是正己烷:异丙醇=97:3,做完后先用异丙醇冲洗直至基线稳定,然后再用正己烷冲洗2-3小时~~
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  • miracle   2009-12-29 16:39  可用分  +1   已有朋友回复您的问题!
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aa_tang[使用道具]
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回复 #1 ranran719903 的帖子

从填料类型及涂敷方式看,该色谱柱是Daicel 的Chiraleel OD / Chiraleel OD-H柱 或者是其他公司相同填料的手性柱。
Daicel Chiraleel OD-H手性柱及其他类型的手性柱使用手册可以参考下面这两个帖子:
手性柱CHIRALCEL OD-H 使用手册
cuturl('http://www.antpedia.com/?uid-14589-action-viewspace-itemid-48415')
多糖类衍生物的手性固定相使用手册
cuturl('http://www.antpedia.com/?uid-1099-action-viewspace-itemid-49333')

通常来讲,手性分析的样品都是很“干净”的(化学纯90%以上),若确信没有其他杂质或者基质等,第二天需继续实验的话,可以不洗柱。毕竟手性柱平衡起来很慢的。若间歇三五天之后才用,则可以用100%异丙醇洗柱,由于异丙醇粘度大,防止压力过高,建议低流速洗(比如0.2mL/min,对于4.6*150而言)。洗至基线平,通常需半小时~1小时。然后用正己烷-异丙醇(90:10)封柱。(这亦需要花1小时左右)。

“我们现在的流动相一般是正己烷:异丙醇=97:3”,这个体系的洗脱强度属于偏小的,若有化合物没洗出来的话,可以增大醇的比例。
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这根柱子是OD-H柱,传输保存溶剂是IPA与Hexane,正相模式。看说明书上有写明两者的比例。用默认的溶剂比率冲就行,调整流动相是最好用IPA做过渡。
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楼主这样做应该可以了,最后一般保存在脱水的纯正己烷中
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异丙醇就不用了吧,正己烷冲洗1h就够了,冲洗时也可以关灯了
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QUOTE:
原帖由 ranran719903 于 2009-12-29 15:24 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
实验室新买了一个正相手性柱,其中柱子硅胶表面涂敷有纤维素-三(3,5-二甲苯基氨基甲酸酯),一般使用的流动相是正己烷跟异丙醇~~
请问实验完成后使用什么流动相冲洗柱子呢??需要冲洗多久?柱子应该保存在异丙醇还是正己烷中呢??
我 ...

针对你的情况,做完样品后,多走15分钟,关机即可。

不需要再冲洗了。
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notrjhn[使用道具]
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看说明书,我认为直接用正已烷冲洗就行了。
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回复 #1 ranran719903 的帖子

冲柱子应该用大比例的异丙醇冲,比如20%的异丙醇,因为此柱属于正相柱,加大溶剂极性可增强流动相洗脱能力。保存柱一般也是在正己烷:异丙醇=80:20的溶剂中封存。纯的正己烷保存容易变质。
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kflsjjfdl[使用道具]
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异丙醇粘度很大,需要采用小流速,或降低比例哦,否则柱压会超限的
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先用多一点异丙醇冲洗柱子,然后保存在90%的正己烷中。
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