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标题:[未解决]现在用福林酚法测试总酚含量吸收度很低为何?

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倾轻地[使用道具]
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现在用福林酚法测试总酚含量吸收度很低为何?

现在用福林酚法测试总酚含量。
参考的茶多酚的总酚含量测定,有国家标准的。
配置没食子酸标准溶液(10ug/ ml-50ug/ml),加5ml 稀释10倍的福林酚试剂,4ml浓度为7.5%的碳酸钠,1h后测定。
我做全波长扫描的时候,400到800部分吸收度相当的低,甚至是负数,但是有变化趋势,就算扫到1000nm吸收的峰型也是很平滑的,也比较低。
按照道理国标中的这个浓度测定的话 不该这么低的吸收度。
现在唯一怀疑的问题是不是蒸馏水的问题。因为实验室没有蒸馏水设备,一般液相用水都是买的娃哈哈,实验中的一般用水就拿过滤过的自来水,我是用后者来替代蒸馏水的,是不是里面的有些离子影响实验?
是不是我该用娃哈哈来试一下?
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雨儿[使用道具]
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我觉得是你的福林酚的问题,你的福林酚试剂是自己配置的还是买的现成的,如果是现成的应该是直接使用的,不用稀释。
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落叶无声[使用道具]
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福林酚是买的现成的,酸度为1N,国标中茶多酚用的就是这个(购买的时候客服说咨询过茶叶标准制定的研究所,当时制定标准用的就是这个酸度的),是稀释10倍做的,一些国外文献也是要稀释的。
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我是夜猫子[使用道具]
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记得刚开始时我也是按gb加福林酚 结果吸光值太小
于是在增大福林酚量后就好多了
建议做工作曲线时按实际浓度算而不是按gb上说的浓度,会好
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倾尽温柔[使用道具]
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吸光度的数值较低的话 待测液的浓度也是影响因素,我现在50ug/ml的没食子酸溶液 一毫升,加入10ml容量瓶反映体系,吸光度也能达到0.5以上,就是十分不稳定,1h的时候取出来测定后把比色皿里的溶液倒回容量瓶,摇匀后立马倒进比色皿再测,吸光度都有0.03甚至更高的差别,我的的确确是摇匀了。就是不知道怎么回事。

福林酚的用量需要进行实验得出,应该有个最适的量。
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舞疯[使用道具]
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碳酸钠浓度和加入量,注意下这个
50ml容量瓶显色,在没食子酸达到10ppm以下选国药的福林酚1.5ml就可以了,我的结果是这样
大体是1ppm没食子酸对应0.1ml福林酚
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翔少爷[使用道具]
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麻烦问一下,测多酚的时候,还原糖对结果的影响大不大?
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小米粒[使用道具]
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你好!我现在也在测总酚,但做三个平行试验,三、三个平行实验的吸光度值都差别很大,你们有没有出现这种情况呢?郁闷啊,做了N次都是这样的结果,求指教啊!
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星星……[使用道具]
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我做的是0.5ml样品(标准曲线)+ 1ml 10% FC试剂 +2 ml 20%的碳酸钠,妥妥的
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kaixinjiuhao[使用道具]
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楼主,问题出在碳酸钠上,你提供的碱性环境不够,你把碳酸钠替换成加入1.5毫升饱和的碳酸钠试试
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