吸光度法测蛋白水解液中的多肽求助

原子吸收 » 讨论区 » 分析百问 » 吸光度法测蛋白水解液中的多肽求助

18 1/2 1 2 ››

需要登录并加入本群才可以回复和发新贴

打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:[未解决]吸光度法测蛋白水解液中的多肽求助

[未解决]本主题悬赏可用分 10

翔少爷[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 108018
精华 0
积分 955
帖子 1109
信誉分 100
可用分 1444
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态离线

发表于 2013-6-22 12:40 资料个人空间短消息加为好友

小中大

要吸光度法测蛋白水解液中的多肽，需要用三氯乙酸把大分子量的蛋白给沉淀掉，该选择什么标准物质做标准曲线呢？朋友们你们都选的什么标品做的标曲啊，交流一下啊，谢谢

小米粒[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 108019
精华 0
积分 956
帖子 1111
信誉分 100
可用分 1448
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态离线

发表于 2013-6-22 12:41 资料个人空间短消息加为好友

小中大

用酪蛋白磷酸肽作标品，以酪蛋白磷酸肽（CPP）为标准绘制标准曲线，用双缩尿法测定。称取酪蛋白磷酸肽（CPP）标准物0.5000g溶解并用50ml容量瓶定容至50ml，即10mg/ml，分别吸取0、2、4、6、8、10ml，标准溶液于试管中，加水补足10ml，各加入双缩脲试机4ml，混合摇匀后，在室温下放置30min后，采用分光度计在540nm下测定光密度值。根据光密度值与多肽的浓度绘制标准曲线，根据标准曲线测定多肽的含量。
我也打算测定，还没买CPP

星星……[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 108020
精华 0
积分 941
帖子 1102
信誉分 100
可用分 1450
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态离线

发表于 2013-6-22 12:44 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我以前用蛋白胨当参照物，用福林酚法做标准曲线

kaixinjiuhao[使用道具]
五级
Rank: 5

UID 106687
精华 0
积分 1533
帖子 1886
信誉分 100
可用分 2236
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-4-3
状态离线

发表于 2013-6-22 12:47 资料个人空间短消息加为好友

小中大

考马斯亮蓝法测定蛋白质的标准曲线, 用牛血清蛋白

大球球[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 108023
精华 0
积分 934
帖子 1088
信誉分 100
可用分 1480
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态离线

发表于 2013-6-22 14:10 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我当时用的是牛血清蛋白，双缩脲法测定的，双缩脲反应是肽键的特征反应，不过个人认为最好是用寡肽或多肽做标准品，比如酪蛋白磷酸肽等

美丽婷婷[使用道具]
五级
Rank: 5

UID 106600
精华 0
积分 1569
帖子 1937
信誉分 100
可用分 2482
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-4-1
状态离线

发表于 2013-6-22 14:14 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我一开始用的是BSA，可是三氯乙酸能把它给沉淀一部分，感觉这样就不太准了。

双_视野[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 108026
精华 1
积分 956
帖子 1108
信誉分 102
可用分 1400
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态离线

发表于 2013-6-22 14:19 资料个人空间短消息加为好友

小中大

有用酪氨酸做标准的
国标不都是测总氮的吗？

莫莫莫[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 108028
精华 0
积分 925
帖子 1070
信誉分 100
可用分 1457
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态离线

发表于 2013-6-22 14:23 资料个人空间短消息加为好友

小中大

国标测多肽也是用的凯氏定氮跟氨基酸分析仪啊
个人观点仅供参考

千里之外[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 108029
精华 0
积分 936
帖子 1091
信誉分 100
可用分 1452
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态离线

发表于 2013-6-22 14:27 资料个人空间短消息加为好友

小中大

这个可以在网上找的，相关资料比较多，很多测酶活都用这个方法，先蛋白和酶反应，然后用三氯乙酸沉淀，以酪氨酸做标准。

grace![使用道具]
五级
Rank: 5

UID 106596
精华 0
积分 1536
帖子 1891
信誉分 100
可用分 2406
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-4-1
状态离线

发表于 2013-6-22 14:31 资料个人空间短消息加为好友

小中大

你有没有看过大豆肽粉和海洋鱼低聚肽粉的国家标准？分析方法都有的。

18 1/2 1 2 ››

原子吸收

原子吸收 » 讨论区 » 分析百问 » 吸光度法测蛋白水解液中的多肽求助

标题:[未解决] function setanswer(pid){ if(confirm("您确认要把该回复选为“最佳答案”吗？")){ document.delpost.action='misc.php?action=bestanswer&tid=231471&pid=' + pid + '&bestanswersubmit=yes'; document.delpost.submit(); } } 吸光度法测蛋白水解液中的多肽求助

吸光度法测蛋白水解液中的多肽求助

标题:[未解决]吸光度法测蛋白水解液中的多肽求助