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标题:[未解决]凝胶过滤色谱与高效液相色谱的区别求助

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
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发表于 2013-6-22 16:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

凝胶过滤色谱与高效液相色谱的区别求助

凝胶过滤色谱与高效液相色谱的区别
这两个色谱在分离纯化多肽时有何优缺点？
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XXXX111[使用道具]
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发表于 2013-6-22 16:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
凝胶过滤是通过分子量大小来进行分离的，跟HPLC用的柱子不一样，好像应该先过凝胶柱然后再上液相吧，我也是新手，最近也在分离纯化多肽，可以一起讨论哇
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差不多先生[使用道具]
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发表于 2013-6-22 16:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
如果凝胶是通过分子量进行分离，那超滤可以代替凝胶了吧，我超滤后直接进行液相也行了呗，是这个意思吗？
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孤独的渔夫[使用道具]
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发表于 2013-6-22 16:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
凝胶比超滤分的更细吧，超滤是初分，我也用超滤分了，然后上离子交换柱，不过目前离子交换柱分的效果不太理想，还在摸索阶段，如果超滤后直接进行液相，可能杂质会比较多吧，我也不是很懂啦
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敬候佳音[使用道具]
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发表于 2013-6-22 16:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你的离子交换柱是什么样的？用什么填料啊？
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倾轻地[使用道具]
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发表于 2013-6-22 17:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我的柱子比较大诶，是4*40cm的，填料用的是SP Sephadex C-25
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雨儿[使用道具]
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发表于 2013-6-22 17:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
凝胶过滤色谱需要特殊的设备吗？怎么控制流速啊？
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落叶无声[使用道具]
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发表于 2013-6-22 17:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这个我没做过诶，我也不清楚，控制流速我用过恒流泵，如果做液相什么的，流速在电脑上设置一下就行了
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我是夜猫子[使用道具]
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发表于 2013-6-22 17:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我就在想这个凝胶过滤怎么做呢，最近要做，也没有人指导我，不用恒流泵的话，简单调一下流速，用标样先走一次，每隔几分钟一收集，用紫外检测器检测，绘制曲线，找到峰值，记住出峰时间，再进行上样，再相应出峰时间进行收集，是这样的吗？
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发表于 2013-6-22 17:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
嗯，应该是这样，但是不用恒流泵怎么控制流速？
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