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标题:[未解决]用碱溶酸沉法提取肝脏蛋白求助呀

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
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发表于 2013-6-22 17:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

用碱溶酸沉法提取肝脏蛋白求助呀

本人刚做实验，用碱溶酸沉法提取肝脏蛋白，想问一下在测定等电点是，最后干燥的条件是什么？干燥多长时间？还有就是碱溶酸沉法中NaoH调浸提液的PH是怎么设定的呢？谢谢
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我是夜猫子[使用道具]
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发表于 2013-6-22 17:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
最后的干燥一般都是用冷冻干燥的，这样蛋白质不会失活。
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倾尽温柔[使用道具]
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发表于 2013-6-22 17:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
调pH值其实就是碱溶，很多蛋白质的等电点时酸性的，所以理论上来说pH值越高，溶解度越大，蛋白质的提取率越高。但是考虑到实际情况，太高的pH值会让蛋白质失活等原因一般不会超过10.。
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舞疯[使用道具]
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发表于 2013-6-22 17:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
等电点的测定一般不是用电泳测定吗，不需要干燥啊？用NaOH提取的PH值设定我们是根据实验确定的。
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翔少爷[使用道具]
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发表于 2013-6-22 17:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我觉得你得多看看相关的文献  我做过扁豆粗蛋白的提取  当时也用的是碱溶酸沉法
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小米粒[使用道具]
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发表于 2013-6-22 18:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
那调节PH的NaOH的浓度怎么设定呢？
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发表于 2013-6-22 18:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我提取蛋白后用的是冷冻干燥，调pH用的NaOH的浓度是根据自己的实验自己选定的，没有特定的浓度
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kaixinjiuhao[使用道具]
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发表于 2013-6-22 18:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我做的也是蛋白质的提取，但是我要的蛋白质不需要活性，所以只需要溶出更多就可以，由正交试验我的提取PH调节在12左右。
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大球球[使用道具]
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发表于 2013-6-22 19:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
如果不需要活性的话，用什么干燥方式都行的。
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美丽婷婷[使用道具]
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发表于 2013-6-22 19:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
酸沉之后，用去离子水洗2-3次，怎么清洗？还有调PH至中性，重新溶解沉淀怎么弄呢？还有考马斯亮蓝法中算提取率，提取液的体积具体指哪个？
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