样品前处理

柱层析是方程繁琐、效率低下、劳民伤财的苦差，你做之前需要有一定过得心理准备哦。呵呵
如何确定纯水洗脱体积和Nacl溶液的洗脱体积？
纯水洗脱是为了洗掉中性多糖，一般来说洗2个柱体积就可以了。（但但是严格来讲是应该在检测流出柱子的收集液不再含有多糖的时候，就可以换洗脱液了），至于Nacl溶液，按浓度有低到高，阶梯式洗脱，一般浓度不会超过2mol/L，洗脱体积还是和之前一样，洗2个柱体积就可以了。（但但是严格来讲是应该在检测流出柱子的收集液不再含有多糖的时候，就可以换洗脱液了）。当然你也可以选择使用线性洗脱，线性洗脱理论上讲，洗脱效果会更好。

填料都有说明的  一般是30~40mg/ml的粗多糖的量吧 反正我当时是上样量是16mg/ml

好像这个 是阶段梯度洗脱  有那个线性梯度洗脱的 可以根据出管时间-盐浓度建立的线性曲线计算出最大组分的那个盐浓度~~~不过我觉得还是线性洗脱比较好 哈哈

为什么要用盐纯呢

为什么要用盐纯呢，直接用乙醇纯化不行么，分级醇化，这很方便的，我以用用过

大家好，本人最近在进行DEAE-52纯化多糖的实验，但是做洗脱曲线的时候遇到了很多问题，请求大佬帮忙解答。
1.本人用的柱子是2.5×60cm的，柱体积在60ml左右，上样量为65mg，浓度为10mg/ml，用0~0.5mg/ml的氯化钠梯度洗脱，洗脱曲线如下图所示，峰值乱七八糟的，这是什么原因造成的呢？
2.我在用苯酚硫酸法测吸光度的时候部分样品的吸光度比空白(相应洗脱浓度盐溶液)还低很多，从颜色上看盐溶液比较黄，而部分样品反应后溶液接近无色，这点也让我很费解
请求大佬帮忙解答一下疑惑