之前校过零了，怎么有的值会是负的？

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标题:[未解决]之前校过零了，怎么有的值会是负的？

[未解决]本主题悬赏可用分 10

孤独的渔夫[使用道具]
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发表于 2013-6-24 12:47 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我用NaCl线性洗脱，之后测吸光度，之前校过零了，怎么有的值会是负的？而且吸光度都很小，看文献有的吸光度都大于1了，我的最高的才0.1，请各位高手解惑啊啊啊

敬候佳音[使用道具]
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发表于 2013-6-24 12:47 资料个人空间短消息加为好友

小中大

你用什么仪器做的，有没有作图表？

倾轻地[使用道具]
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发表于 2013-6-24 12:51 资料个人空间短消息加为好友

小中大

太不详细了啊
先问你问题：
在线检测的？还是接取部分用紫外检测器检测？
一般以在线检测吧，wash之后到基线，再线性elution应该出峰，
这个峰如果很小，那就是吸附量很低；去找你的柱子和吸附条件的问题，别的原因可能性不大。
这个峰如果很大，你把它接到试管中了，去紫外测吸收，而吸收值很低，很可能你的对照组有问题
因为盐溶液对紫外吸收也有影响，不知你多肽是在什么波长测的。

雨儿[使用道具]
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发表于 2013-6-24 12:54 资料个人空间短消息加为好友

小中大

校零出现问题了吧
试试UV-1100型紫外可见光分光光度计

落叶无声[使用道具]
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发表于 2013-6-24 12:57 资料个人空间短消息加为好友

小中大

是接取部分用紫外检测器检测的，多肽是在220nm测的，我是新手，第一次过柱子，看到文献里用SP Sephadex C-25这种填料纯化多肽，所以买来试试，神马都不懂

我是夜猫子[使用道具]
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发表于 2013-6-24 13:01 资料个人空间短消息加为好友

小中大

可怜的娃啊，虽然不知道你具体怎么测量的。
我没检测过多肽，可是经常做蛋白质。
不能这么测量吧？？！！220nm检测不靠谱的。
几乎所有小分子在215-230nm都有明显吸收。
尤其是盐类在230左右对生物大分子的吸收干扰很大的。

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发表于 2013-6-24 13:04 资料个人空间短消息加为好友

小中大

不会吧我全是220nm检测的，看文献都是这个波长检测多肽啊，你是多少波长检测的？

舞疯[使用道具]
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发表于 2013-6-24 13:08 资料个人空间短消息加为好友

小中大

哦，我没说明白，在220nm可以测，但是要测纯溶液吧，我觉得不能含盐。
文献这么测，应该是无缓冲液，或者脱过盐的吧？
我没看过这类的文献，说的只是个人经验。
不要怕，多问问别人

翔少爷[使用道具]
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发表于 2013-6-24 13:12 资料个人空间短消息加为好友

小中大

脱盐不会还要过柱子才能脱吧？
知道的牛人帮忙解答一下！

lisa2002[使用道具]
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发表于 2013-12-14 21:55 资料个人空间短消息加为好友

小中大

不要只看别人的值，不同型号的仪器，不同的仪器状态、不同的标准溶液等等都会影响吸光度值得。

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原子吸收

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标题:[未解决] function setanswer(pid){ if(confirm("您确认要把该回复选为“最佳答案”吗？")){ document.delpost.action='misc.php?action=bestanswer&tid=231808&pid=' + pid + '&bestanswersubmit=yes'; document.delpost.submit(); } } 之前校过零了，怎么有的值会是负的？

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