样品前处理

如题，向各位大侠在酸价大于2时用三氟化硼-甲醇甲酯化来进行脂肪酸分析的具体步骤啊。 小弟看了下国标和一些文献上如《气相色谱法中油脂脂肪酸衍生化方法及其选择》用的方法有所不同，后者介绍的方法大致如下：
称取150 mg 油样于50mL 容量瓶中，加入0. 5mol / L NaOH - 甲醇溶液4 mL 使之溶解，待溶液呈透明状后，置水浴上沸腾5 min，冷却后，加入5 mL BF3 - 甲醇溶液，再置水浴上沸腾2 min，使甲酯化完全，加入足够量饱和氯化钠溶液，上层有黄色液体，加1 ～ 1. 5mL 石油醚，振摇，静置，将其萃取到醚层，取上层（石油醚层）溶液进行色谱分析。另外也有不少文章介绍用6O℃水浴中皂化15 min，加正已烷和饱和氯化钠溶液使之分层后再取上层液测定。

第一种方法比较好，但是也有一个问题，这种甲酯化方法是边加热，边摇动的情况下加入正己烷和BF3的，实验需要冷凝管接入冷凝水，每个步骤都有时间要求的，最后加入饱和食盐水萃取出正己烷层进行气相分析即可。

请问第二种方法，也需要接入冷凝管冷凝吗？
您给我的另一回帖中推荐直接甲酯化：即利用甲醇钠或者1mol/L的氢氧化钠-甲醇或氢氧化钾甲醇甲醇溶液，直接甲酯化，最好在60℃烘箱中，保持15-30min，并间歇性摇动，根据我的经验，结果较好。
这种方法可以用于AV>2以上的油脂脂肪酸分析吧

可以
你也可以用其他AV小于2的油脂做个对比

那太好了。省去用BF3了。
请问一下，这个在烘箱中保持30分钟，可不可以改成在水浴中60度啊？
另外，30分钟以后再怎么处理？要不要离心什么的？
我以前用的是2 M mol/mL氢氧化钾甲醇溶液测的酸价小于2的油，效果不错。但拿去测酸价高的油时，变化趋势就不行了。

水浴也可以，但保证不能有水进入样品中。
30min之后，当然要离心，完了之后最好过滤下进行GC分析，保护柱子。

真的啊！初榨橄榄有混合精炼橄榄油能测？不要告诉我是橄榄油混合大豆油。并且橄榄油混合5%以下的大豆油之类的目前仪器还是有限的。再就是要测的速度要快。海关可没时间等你。

现在把我设想的步骤列出来，麻烦您帮忙再看看哪些地方不恰当啊
1、称取油样0.2 g左右，2 mL 正己烷溶解
2、 加入0.2 mL 2 mol/L氢氧化钾-甲醇溶液振荡混匀，60度烘箱15-30 分钟，期间每隔5分钟左右摇晃一次。
3、3000 RPM 离心 5 分钟。
4、取上清行GC上样。

就是在60度烘箱时，如果用的是那种自带的按压盖子的离心管（不是旋钮盖），会很容易膨胀而使溶液流出。不知道你有没有碰到这个小问题

用旋盖的，不要用压盖的，旋盖的不要旋太紧，有部分溶剂挥发是正常的