【求助】SDS-PAGE转印完缺条带!!

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标题:【求助】SDS-PAGE转印完缺条带!!

人小鬼大[使用道具]
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发表于 2013-7-3 15:07 资料个人空间短消息加为好友

小中大

郁闷，最近Western转印完，丽春红染NC膜后发现，某些泳道在80KD-130kD左右染色就是空白，看不到条带（一般10个泳道会有1、2个泳道这样），最后ECL显影那个地方就是没有条带！！！！或者，很淡很淡。。。。。如下图所示，第5个泳道缺了一块======================》
我们确定不是由于转印时气泡所引起的，而且以前没有出现过这样的情况。转印我们用的是湿转，120v 90min。以前没有任何问题！不知道现在怎么了。
想请教各位精英大侠们，帮忙看一看，知道的说一下哦，谢谢。

附件

2013-7-3 15:07

85286730.snap.jpg (26.33 KB)

131415[使用道具]
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发表于 2013-7-3 15:08 资料个人空间短消息加为好友

小中大

回复 #1 人小鬼大的帖子

重复过实验吗？重复的实验也是这样吗？建议你确认一下电泳的玻璃板是否洁净，洗干净后烘干后使用，也可以将这个第五泳道的样品换个泳道来跑。

人小鬼大[使用道具]
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发表于 2013-7-3 15:32 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 131415 于 2013-7-3 15:08 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
重复过实验吗？重复的实验也是这样吗？建议你确认一下电泳的玻璃板是否洁净，洗干净后烘干后使用，也可以将这个第五泳道的样品换个泳道来跑。

重复了好多次了，而且每次缺的泳道都不固定，缺的蛋白大小都是一样；
我们的玻璃板都是用超纯水冲洗过，而且等晾干后才组装的；
上的样品基本都是一样的。

131415[使用道具]
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发表于 2013-7-3 15:33 资料个人空间短消息加为好友

小中大

如果你确定不是气泡的问题，可能是夹子松了！

人小鬼大[使用道具]
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发表于 2013-7-3 15:33 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 131415 于 2013-7-3 15:33 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

如果你确定不是气泡的问题，可能是夹子松了！