小中大GST亲和层析纯化后纯度应该就比较高了,为什么还要再疏水纯化啊?
我们做疏水层析的时候盐一般用硫酸铵,二价盐离子强度大,有利于疏水氨基酸的暴露,从而更好的与疏水柱结合。
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过完GST后,发现目的蛋白附近(5-6kD)左右还存在两个条带,而且量还很多。可能是由于降解什么的原因吧。总之还需要再一步纯化~
现在感觉HIC做最后的精细纯化效果并不好,呵呵~谢谢版主大人回复啦。