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标题:【讨论帖】StepByStep 学习核酸序列分析软件DNAssist1.0

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【讨论帖】StepByStep 学习核酸序列分析软件DNAssist1.0


我始终抱着这样的想法,“一个例子学会一个软件的基本使用”。其实用几分钟就可以学会那些我们经常需要使用的功能:)感谢jnuxz斑竹和zyh961171战友的加盟,让我们把领初学者进门的努力进行到底!
做DNAssist的StepByStep的时候,我想起了刚上博士的时候在实验室里,我们拿到测序结果时,通常要找个师兄弟,一个人“ATGC...”地高声念着期望的序列,一个人听着,“塔塔塔...啪”地三下光标一下空格键地把测序结果分成一个个密码子,看碱基序列和阅读框有没有出现错误。每当有节奏的“塔塔塔...啪”的声音响起,我们就知道,又有人的测序结果来了。那里可是一个巨牛的实验室啊:)直到有一天有个人不经意地说,有个软件可以对测序结果的......
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DNAssist可不仅仅是对测序结果的。它处理我们平常需要的一些关于DNA,RNA和蛋白质的基本数据,对表达非常有帮助。这里用一个例子来说明它的功能。主要演示①对测序报告(序列比对);②DNA的物化性质、限制性酶切位点图谱分析;④分析蛋白质的物化性质、抗原性、疏水性。
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1. 安装好DNAssist1.0后,从开始/程序中打开这个软件。


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2.打开后的界面如图。


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3. 现在我们来进行一个序列比对(Align)。我常这样对比测序报告;或看某个基因在融合蛋白基因的哪个位置等。这里说对测序结果。建立一个新的DNA序列,即file/new/DNA。然后把预期的DNA序列(如AB-CTB)拷进去。注意!!只能是纯粹的ATGC,而不能有空格和其他字母!!否则不能拷贝进去!这个问题我们实验室来来去去的人不知道问过我多少遍:(


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4.再同样新建一个DNA序列,把测序结果拷贝进去(自动编为sequence 0)。也要注意同上!!因为测序结果里面有N,必须把这些N去掉,一个不剩,否则拷不过去!如果觉得好长的结果里面才有一个N而舍不得把序列都删掉的话,就把它换成ATGC中的一个就可拷贝了,不过要自己记住呀:)


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5.序列比对。用工具栏Analyze/Align...命令,出现Align sequences 窗口。将这两个序列的名称都点一下,选中,然后单击Align。


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6. 哇!怎么这样啊!这么多没有对上?!再去看测序结果和原来从NCBI上找到的序列对不对......原来是用的反向测序,我们需要用反向互补序列来对结果:)


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7.不怕!将测序结果(sequence 0)全部选中,用Convert/Reverse-complement(反向互补)命令把它换过来。
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8. 然后再进行Analyze/Align...。紫红色部分都是序列相同的。前面是几个是先头几个测序不太准的,不管它。中间有一个C变成了A,是我做的突变。怎么样!感觉不错吧:)
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