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标题:【讨论帖】皮尔斯的发光底物比GE的差很多

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发表于 2013-7-10 13:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【讨论帖】皮尔斯的发光底物比GE的差很多

实验过程：
1. 将SIGMA公司HRP标记的羊抗兔1：10，000开始，5倍稀释。
点1ul到NC膜上，点完后迅速泡到PBS里。
2. 配好发光底物后取出膜，将SuperSignal West Pico与ELC prime 分别加200ul到两块膜上。1min后，在膜表面覆盖塑料膜。
3. 照相
4. 将照相后的膜使用蒸馏水冲洗，然后加入TMB显色底物显色，看两膜显色深浅有无差别。
结果：1. 发光情况


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 小中大
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 小中大
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发表于 2013-7-10 13:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
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发表于 2013-7-10 13:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
从以上图片可以看出，SuperSignal West Pico比ELC prime灵敏度约低25倍。
2. 两张膜上上样量有无区别？

从图上可以看出，加入TMB显色底物后，两膜第三点均能显色，而第四点均不显色。说明上样无明显区别。
结论：SuperSignal West Pico灵敏度较低，与TMB显色相近。（sigma的TMB显色液标称灵敏度0.125ng）

跟他们公司的技术沟通了下，结果回复：感谢您致电Thermo Fisher Scientific，并使用我们的产品！
从您目前使用我们的底物情况来看，在建议抗体浓度范围内可以获得光信号，我们认为此底物是正常工作的。由于我们提供的产品出厂前都是经过严格的质量认证，而此认证数据不是依赖于与其他公司产品的比较得出。实验中各种条件的差别也不能在一次实验中反映，所以对您提供的结果我们无法做出评价和解释。

很是无语。
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发表于 2013-7-10 13:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

看他们网站的产品介绍cuturl('http://www.thermo.com.cn/Product4718.html')

SuperSignal West Pico化学发光底物

比GE ECL系统花费更少却能获得两倍的信号。


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发表于 2013-7-10 13:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
Thermo Scientific SuperSignal West Pico比GE ECL底物更灵敏。经连续稀释（50-0.003ng）的重组小鼠IL-2蛋白经电泳后转移至硝化纤维素膜上，封闭并使用1μg/ml大鼠抗小鼠IL-2抗体稀释液孵育。洗膜后，使用20ng/ml稀释的辣根过氧化物酶标记的山羊抗大鼠二抗孵育。再次洗膜，之后与按操作手册准备好的底物进行孵育。印迹分别曝光1分钟和5分钟。


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发表于 2013-7-10 13:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

millipore有一种ECL性价比较高
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 小中大


QUOTE:
原帖由 taoshengyijiu 于 2013-7-10 13:07 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

millipore有一种ECL性价比较高

皮尔斯他们宣称的那么好，却根本达不到
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发表于 2013-7-10 13:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
各个公司都有自己的特色，有的灵敏度高，有的结果稳定；还有就是最佳实验条件不一致；要是极端情况下，宝马不一定比吉利好使哦

当然现在很多产品比较信息确实不怎么样，基本就是偏离常识

不过有的品牌还是比较靠谱的，对自己苛刻到“出众”这样的词都不准用，简直是自虐啊；而且人家产品确实算得上出众哦。
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