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标题:[未解决]HPLC水相多过度到有机相多,有什么决窍吗?

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
xiaoweiwe121[使用道具]
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HPLC水相多过度到有机相多,有什么决窍吗?

液相梯度洗脱一般都是水相多过度到有机相多,到底有什么决窍啊?~~大家交流下。。。
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naren4545[使用道具]
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那是因为我们把需要的组分跑出来后,其它的就不重要了!
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  • miracle   2010-1-23 22:16  可用分  +3   欢迎参与技术讨论!
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yanli4283[使用道具]
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您的问题说的有点含糊,按照溶剂极性顺序表进行调整。直到所需要的组分完全分离开为止。
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  • miracle   2010-1-23 22:16  可用分  +3   欢迎参与技术交流!
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sacred[使用道具]
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在反相色谱中,如果有机相多过水相的话,梯度还没开始走,所有成分都被洗脱了,就无法分离了。看看溶剂极性相关的资料就明白了。
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  • miracle   2010-1-24 11:17  可用分  +2   欢迎参与技术交流!
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ccf335[使用道具]
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有机溶剂具有强洗脱性质,对于反相色谱,如果含量过高,所有成分都被洗脱出来了,所以按照极性不同依次洗脱物质,则逐渐提高有机相的比例
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maomi530[使用道具]
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梯度洗脱时,将在分离过程中按照一定的程序,连续改变两种(或多种)极性不同的流动相的浓度配比和极性,并通过流动相极性的变化进而改变被分离样品的选择因子值和保留时间,以使色谱柱具有更好的选择性和更大的峰容量。采用梯度洗脱技术可以提高分离度、缩短分析时间、提高灵敏度。此方式适于分离复杂混合物,特别是保留性能相差较大的混合物。
当使用反相色谱时,逐步提高有机相含量,额可以使得在色谱柱上强保留物质更快速洗脱下来,节约分析时间。
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kflsjjfdl[使用道具]
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概念不一样,反相色谱固定相是非极性的,物质吸附在上面,然后用流动相冲洗,流动相非极性越大越易把物质给洗脱下来(相似相容原理),而且有机相洗脱能力的强弱和极性关系不大的
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  • miracle   2010-1-25 11:40  可用分  +3   欢迎参与技术讨论!
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zxlyid[使用道具]
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摸条件时候,一般是10%甲醇-100%甲醇1.0ml/min 20min内梯度,如果反过来弄的话,一般的样品在5分钟内就基本洗脱完了,那样做梯度就没啥意思了
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sacred[使用道具]
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与被分离物质的极性有关,根据其极性大小设定合适的梯度起始比例然后根据与杂质分离情况适当调整比例就行了。没有确定的梯度范围,结合实际来设定,多做几次样就知道了。
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unknow[使用道具]
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回复 #1 xiaoweiwe121 的帖子

设计的原则就是流动相从弱的洗脱能力过度到强的洗脱能力。如果反之,则实在有违逻辑。当然如果作为研究,楼主可以用任何方法。
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  • miracle   2010-1-26 20:02  可用分  +3   谢谢您的热心解答!
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