液相色谱

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小弟第一次做液相色谱，毕业实验，是新买的柱子，柱子型号是Hibar®150-4.6 HPLC column
问题1：新柱子是先活化还是先测柱效？怎么活化？怎么测柱效？
     注：柱子（测柱效）说明书：检测物质是（甲苯，蒽，臭樟脑）

                           Eluent:           Acetonitrile/Waters(75/25)
                           Flow Rate:       1.3ml/min
                           inj.Volume:      1ul
                           Detection:        UV 254nm
                           Cell Volume:     3.2ul
                           Temperature:   ambient
          但是上面没写时间，还有一定要用乙腈吗？不能用甲醇代替？
问题2：我的流动相是甲醇和0.0128mol/l乙酸二氢钠，使用前怎么过度？
注：我的想法是： 先用甲醇/水（70/30）做流动相，抽泵，purge，平衡，再停泵，换甲醇/0.0128mol/l磷酸二氢钠（70/30），再抽泵，purge，平衡，最后进样，这样可以吗？
问题3：怎么看出那个是所要检测物质，比如说我测的是己烯雌酚，用标准品检测，所出来的出峰图假设有3个峰，那个是己烯雌酚？
  
  
各位大哥大姐帮帮忙啊，谢谢了

不需要活化，新柱可以按条件做下柱效，不过你有测柱效的溶液吗

直接上你的流动相，柱子用完后先用90:10的水甲醇溶液冲洗半小时再用纯甲醇冲洗半小时

查看下压力是否正常，不正常的话，流动相的比例与流速都不会对。

你的样品是碱性的，可否尝试在流动相里加些甲酸或者三氟乙酸

液相柱子，基本不需要活化的，顶多是平衡，因为柱子保存的溶剂和你要用的流动相可能有一定的差距，一般平衡个十几分钟就OK了。柱效的话，个人觉得用之前最好测试下，避免柱子使用过程出了问题，与经销或者厂家沟通有不必要的麻烦。

测柱效还是很有必要的，主要是为了以后确定柱子是否需要再生或更新的依据。

新竹子不要活化的，不要接检测器冲冲就可以了

要是用盐，在盐前后用90%的甲醇—水过度