小中大先谢过楼上诸位:
软件算的是挺方便,不过结果可靠吗?大家都是这样算的吗--先翻译成氨基酸序列,然后提交给计算机直接读数?
我听说还得加上我的标签大小,但我的载体上才有标签,目的基因上没加,怎么办?大家有人听过这种算法吗?
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如果是原核表达,应该是比较可靠的,因为没有羰基化等对分子量影响较大的翻译后修饰。酵母、细胞等表达系统则另当别论。
这里有个概念问题。你要计算的蛋白是什么?标签是在融合蛋白上的一个特定aa序列,如果你的蛋白以融合形式表达,当然要将标签计算在内。最简单的方法是将重组载体中含有目的基因的那个ORF考出来,用软件翻译成aa,再计算该aa的分子量。
“但我的载体上才有标签,目的基因上没加,怎么办?”再学习一下“标签”的概念。