【求助】请高手指点我做的明胶酶谱图片中的问题

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标题:【求助】请高手指点我做的明胶酶谱图片中的问题

wanglaoshi[使用道具]
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发表于 2013-7-31 12:44 资料个人空间短消息加为好友

小中大

最近几天做了明胶酶谱，实验室没有人做过这个实验，不知道自己做出来的是不是就是正确的条带，请高手指点。附图片这是5月27日做的，从右边数2/3/4/5孔加的是大鼠脑组织，7/8/9/10孔加的是大鼠肾脏组织。不知道肾脏组织那4个孔中的那三条透亮条带是不是就是所谓的MMP-2,MMP-9条带呢？第一次做酶谱，请大家指点。谢谢！
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2013-7-31 12:44

29622554.snap.jpg (26.21 KB)

wanglaoshi[使用道具]
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发表于 2013-7-31 12:44 资料个人空间短消息加为好友

小中大

这是5月28日做的，从右边数1/2/3/4孔加的是大鼠造模型后3h脑组织样本，6/7孔加的是正常大鼠脑组织样本，8/9孔是大鼠肾脏组织样本。请问一下1/2/3/4孔中的3条透亮条带是不是就是我所需要的透亮条带呢？另外，不知道我脱色是不是脱过了，使得背景颜色太浅了呢？

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2013-7-31 12:44

58150823.snap.jpg (38.91 KB)

wanglaoshi[使用道具]
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发表于 2013-7-31 12:45 资料个人空间短消息加为好友

小中大

这张图片和上面那一张是同一张凝胶图片，急求高手指点。

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2013-7-31 12:45

28161543.snap.jpg (27 KB)

kuohao17[使用道具]
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发表于 2013-7-31 12:45 资料个人空间短消息加为好友

小中大

这三张好像脱色都脱过了。看不清你的条带，还是拍照后再看吧。

kuohao17[使用道具]
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发表于 2013-7-31 12:53 资料个人空间短消息加为好友

小中大

最好上一个预染的蛋白Maker

luoliqiong[使用道具]
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发表于 2013-7-31 12:54 资料个人空间短消息加为好友

小中大

最下面的那条貌似不是的，分子量应该很小，上面俩条是吧

memory[使用道具]
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发表于 2013-7-31 12:54 资料个人空间短消息加为好友

小中大

明胶酶谱实验在灌制胶的时候就加明胶的，所以结果是反过来的，条带应该是白的，背景都是蓝色的。

wanglaoshi[使用道具]
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发表于 2013-7-31 12:55 资料个人空间短消息加为好友

小中大

明胶酶谱实验在灌制胶的时候就加明胶的，所以结果是反过来的，条带应该是白的，背景都是蓝色的。

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明胶酶谱的基本原理我懂的，但是我就是不知道跑出来的条带是不是就是所需要的条带。我用的是7.5%的分离胶，4%的浓缩胶。想用蓝色预染的低分子量蛋白MARKER标记一下，但是这种蛋白marker适合的分离胶浓度是12%。我这么低的分离胶浓度标记分子量会有偏差

wanglaoshi[使用道具]
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发表于 2013-7-31 12:56 资料个人空间短消息加为好友

小中大

这三张好像脱色都脱过了。看不清你的条带，还是拍照后再看吧。

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这是第一张图片用凝胶成像系统拍照后的图像，请帮忙给看看。左边那4个孔加的都是大鼠肾脏组织。

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2013-7-31 12:56

58196508.snap.jpg (21.96 KB)

tudou85[使用道具]
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发表于 2013-7-31 12:56 资料个人空间短消息加为好友

小中大

可在点样的时候，带一个细胞培养液道作为marker。细胞培养液中有细胞分泌的MMPs，成分单一，可作为指示。

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