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标题:【讨论帖】染色方法

is2011[使用道具]
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【讨论帖】染色方法

一直用考马斯亮蓝染色法,因为与质谱兼容性好,但染出来的点很少,而且水化上样量也很难控制好,试过银染,点很多但不能与质谱兼容,有人建议用胶体考染的方法,有没有同行做过,借鉴一下.
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xyw5[使用道具]
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我一直用的银染分析的凝胶,但是因为不能与质谱兼容,现在正准备做胶体考染,具体的步骤在GE的双向电泳说明书上详细的解释,楼主可以看看
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tuuu2[使用道具]
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我也一直在用考染,和楼主面临同样的问题,但不知胶体考染是否比一般考染具有明显的优势。
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据大家反映,胶体考染比一般的考染要灵敏很多:)
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laughing妹[使用道具]
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目前的染色方法我在下面这个表里做了个总结, 包括了胶体考染(G250), 常规考染(R250),银染, 以及荧光染的一种(Sypro Ruby), 比较了他们的灵敏度, 检验的动态范围(线性分布范围)以及与质谱的兼容程度, 希望对大家有帮助。

其中银染的动态范围最差, 和质谱兼容性也不好, 考染兼容性好, 但灵敏度比银染稍差, 荧光染兼有上述两种可见光染色的优点,可惜成本太高。 综上所述, 还是推荐大家用G250胶体考染!


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u234[使用道具]
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胶体考染不错
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我用的叫:blue silver的胶体考染,是胶体考染的改进,主要是将G250从0.1%增加到0.12%,将磷酸从2%增加到10%,但总感觉有很多溶不了,不知道大家有没有同样的问题?
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轰轰[使用道具]
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blue silver
比普通考染灵敏谢
我现在就是使用这个
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轰轰[使用道具]
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9
 

没有溶是正常的
这反而会提高灵敏度
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standbyme[使用道具]
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在蛋白质组学研究中,银染还是最常用的方法,只要不用戊二醛,就不会干扰质谱结果的.
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