小中大【求助】较多样本的蛋白表达差异实验求助
诸位大虾好:
小弟不才,目前,在设计日粮添加某种饲料对鼠钙代谢通路的关键分子表达差异这一实验。已有文献及本实验室的工作提示了5个已知蛋白分子可能与之有关。为此,拟进行用qRT-PCR探讨这几个蛋白在组织中的mRNA表达水平,准备完成后再进行组织中这几个蛋白表达水平上的检测。
小弟查了下相关文献及技术手册,Western blot自然是首选,免疫组化似乎定量效果不佳。但由于样品过多,近100个,按公司的报价,粗粗估计做5种蛋白的表达差异检测怎么也得9万。小弟认为似乎有些昂贵了,但由于相关知识欠缺,一筹莫展。
想请诸位大虾推荐,做100个组织样品,5个目的蛋白(已知)的差异检测,用什么方法较为合适,经费能控制在7,8万左右?2D电泳?itraq?IHC?Elisa?亦欢迎讨论。
谢谢!