蛋白质与蛋白组学 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】请教蛋白浓缩的柱子或试剂盒或简便方法

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 13  1/2 12››
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【求助】请教蛋白浓缩的柱子或试剂盒或简便方法

popo520[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 103468
精华 0
积分 269
帖子 257
信誉分 100
可用分 2066
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-1-11
状态 离线
1

发表于 2013-8-1 11:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】请教蛋白浓缩的柱子或试剂盒或简便方法

做WB发现目的条带很淡，想浓缩样品，加大上样量，请问各位有什么好的建议，关于蛋白浓缩的柱子，或者试剂盒，或者简便易行的方法？非常感谢！
顶部
lixi559[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 73492
精华 0
积分 560
帖子 820
信誉分 100
可用分 4896
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-23
状态 离线
2

发表于 2013-8-1 11:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
几种方法：

1、超滤离心管：根据目的蛋白的分子量选择相应的型号和体积，一般MillPORE，Sartorius做的都可以，选用平转子的离心机，低速。

2、冷冻干燥法：根据实验室的设备条件进行，操作简单。

3、CaCl2干燥法：在透析袋中装入的蛋白溶液，用CaCl2处理透析袋。PEG(聚乙二醇)，或者蔗糖都可以替代。
顶部
popo520[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 103468
精华 0
积分 269
帖子 257
信誉分 100
可用分 2066
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-1-11
状态 离线
3

发表于 2013-8-1 11:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 lixi559 于 2013-8-1 11:11 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
几种方法：

1、超滤离心管：根据目的蛋白的分子量选择相应的型号和体积，一般MillPORE，Sartorius做的都可以，选用平转子的离心机，低速。

2、冷冻干燥法：根据实验室的设备条件进行，操作简单。

3、CaCl2干燥法：在透析袋中装入的 ...


非常感谢，我要的就是这个！说得很清楚明了！
只是，平转子是什么？是指离心管是垂直放置的吗？倾斜一定角度的为什么不可以呢？
顶部
lixi559[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 73492
精华 0
积分 560
帖子 820
信誉分 100
可用分 4896
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-23
状态 离线
4

发表于 2013-8-1 11:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

角转子 不可以，这与 超滤离心管的结构设计有关 。你买回来看看就知道了
顶部
popo520[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 103468
精华 0
积分 269
帖子 257
信誉分 100
可用分 2066
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-1-11
状态 离线
5

发表于 2013-8-1 11:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 lixi559 于 2013-8-1 11:12 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

角转子 不可以，这与 超滤离心管的结构设计有关 。你买回来看看就知道了

那我就倒了，我们实验室都是有角度的,呜呜呜～
顶部
junhun[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77185
精华 0
积分 561
帖子 781
信誉分 100
可用分 4746
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-14
状态 离线
6

发表于 2013-8-1 11:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

加一种：透析袋中装入要浓缩的蛋白溶液，两端用橡皮筋扎好，两头挂在铁架台固定的夹子上拉紧，找个电风扇开大风吹。只是为了做WB的话，用10ml溶液，浓缩到2-3ml，估计3个小时就可以了。
顶部
popo520[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 103468
精华 0
积分 269
帖子 257
信誉分 100
可用分 2066
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-1-11
状态 离线
7

发表于 2013-8-1 11:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 junhun 于 2013-8-1 11:13 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

加一种：透析袋中装入要浓缩的蛋白溶液，两端用橡皮筋扎好，两头挂在铁架台固定的夹子上拉紧，找个电风扇开大风吹。只是为了做WB的话，用10ml溶液，浓缩到2-3ml，估计3个小时就可以了。 ...

是个好办法，谢谢哦，只是我的蛋白只有几十微，太少了些。
顶部
079777chao[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 107992
精华 0
积分 321
帖子 301
信誉分 100
可用分 2371
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态 离线
8

发表于 2013-8-1 11:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
那我就倒了，我们实验室都是有角度的,呜呜呜～

========================================

角转的可以的，millipore和赛多丽丝都有相关的产品。
顶部
079777chao[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 107992
精华 0
积分 321
帖子 301
信誉分 100
可用分 2371
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态 离线
9

发表于 2013-8-1 11:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你可以用TCA沉淀你的蛋白再跑胶。
顶部
shenkunjie[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76942
精华 0
积分 712
帖子 1124
信誉分 100
可用分 6420
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-11
状态 离线
10

发表于 2013-8-1 11:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
有角度的也是可以的，只是转速不一样，看说明书吧。
顶部
 13  1/2 12››