小中大我也说几点自己的体会:
1,配胶很多人是按照分离胶缓冲液 1.5mol/L Tris•HCl(pH8.8),浓缩胶缓冲液 0.5mol/L Tris•HCl(pH6.8),10%SDS 分开加的,其实这样麻烦,因为这三个在胶里的终浓度是不变的,分别是0.375M,0.125M和0.1%,因此可以把SDS直接分别加进分离胶以及浓缩教缓冲液,配成4x的BUffer直接配胶。
2,WB里面现用现配的有APS,脱脂奶粉封闭液,1抗2抗以及洗脱液,其他比如PBS/PBST,running buffer,trans-buffer,考马斯/立春红等都可配成高倍数的母液储存,用时稀释。
3,分离胶聚合时间长点好,因此可以提前一天配好封存后4度过夜,省时间。
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实验室一直采取储备液的方法,省了很多容器和配试剂的时间
SDS加到缓冲液中我没试过,但是一次不小心把SDS放冰箱了,结果析出好多结晶,缓冲液是放冰箱的,加上SDS的话有没有同样的析晶问题呢?或许浓度小点没关系?
有一次配了胶没跑电放冰箱了,明天跑胶结果条带特别难看,堪比鬼带,不知是不是浓缩胶分离胶同时放冰箱的问题。只能没跑完就停了,重新洗板,干燥,配胶,上样。