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标题:[未解决]蛋白沉淀离心之后一般怎么去上清液呢？

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
kidpk[使用道具]
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发表于 2010-3-4 11:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

蛋白沉淀离心之后一般怎么去上清液呢？

大家好，
我想问一下，
一般蛋白沉淀离心之后，有的是直接倒出上清液，还有的说用移液枪吸出来，
但是呢，一方面倒出来可能会把沉淀倒出来，用枪的话有人建议吸出固定的量，可是这样子的话精密度可以保证，但是回收率却肯定会下降，要达到90%的回收率就不容易了。。。

请问大家通常的做法是什么呢？
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maomi530[使用道具]
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发表于 2010-3-4 13:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
一定要用枪，不用直接倒。也可采用先倒去上层大部份清液（一定不能让沉淀浮起），然后再用枪。
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出国吧[使用道具]
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发表于 2010-3-4 15:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
个人觉得如果回收率稳定（70%以上左右即可），关键是能不能达到足够的灵敏度。因此，如果取上清液的量是固定值，只要能达到是灵敏度要求，可以这样操作。就算不是吸取固定量，也不一定要到，那就尽可能吸干净，当然要达到方法学要求。
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yyid[使用道具]
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发表于 2010-3-4 15:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
按比例吸出固定的量啊,然后以百分比换算.
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zxlyid[使用道具]
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发表于 2010-3-4 21:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
直接倒出上清液:肯定是沉淀粘在管壁上的时候才用，我做兽残的时候常用这种方法，还有就是兽残提取液较多，吸的话很费劲。

用移液枪吸出来：也可以用一次性的吸管吸，如果做药动，分析血样，我感觉还是用枪的比较好，因为枪头嘴细，吸管嘴粗。虽然有文献说吸一定量，但是我们一般是能吸多少是多少，定量不好操作。
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njyyyil[使用道具]
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发表于 2010-3-4 21:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
楼主的回收率能达到90%已经是相当高了，回收率至少达到50%，一般可以接受的是70%以上，从楼主的回收率分析看，稍微降低点回收率是没有多大关系，可以进行这样的操作，关键是看你的回收率能不能达到要求。
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woaifou[使用道具]
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发表于 2010-3-6 20:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
当然要乘个系数了，你吸出90%就除以90%
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