液相色谱

2．9 样品中有关物质测定
精密量取甲磺酸罗哌卡因注射液1 mL，置20 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。精密量取1 mL，置100 mL
量瓶中，加流动相稀释至刻度，作为对照溶液。取对照溶液20u L注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，
使主成分色谱峰的峰高约为满量程的10％ ；再精密量取上述两种溶液各20u L 分别进样，记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍，
供试品溶液的色谱图中如显杂质峰，各杂质峰面积之和不得大于对照溶液主成分峰的峰面积，即规定甲磺酸罗哌卡因注射液样品
中的有关物质应不超过1．0％。

以上是我从一篇文献里摘出来的关于有关物质测定的步骤。有几点不明白之处，想向朋友们请教一下，这个供试品溶液浓度和对照溶液浓度之间是怎么一个关系？上面说的“满量程”是什么意思啊？供试品溶液的浓度应该怎么定呢？

供试品溶液浓度和对照溶液浓度是100倍的关系！满量程是色谱图的高度！

供试品溶液浓度和对照溶液浓度之间一般的话是稀释100倍的关系，所以有关物质是 1.0%。如果要求有关物质小于0.5%，那就要稀释200倍了。这种是自身对照法。供试品浓度基本上自己根据检测器灵敏度调节的，如果按面积归一法，一般不满量程就行，也就是不出现平头峰。如果自身对照法，一般浓度就要很大了，保证吸收小的杂质峰也能够显出来。

供试品溶液浓度:1mL-20mL，浓度5%。浓度高，会显示杂质峰。

对照溶液浓度：1mL-100mL，浓度1%。浓度低，可能不会显杂质峰。

要求：供拭品中的杂质峰面积和应小于对照品的主峰面积。

如果是色谱工作站，可以不考虑“满量程”之类的，只要不出现平顶峰就可以了。

自身对照溶液是用你的供试品溶液定量稀释制成的。杂质对照溶液浓度和自身对照溶液浓度依据有关物质限度及检测方法来定的。满量程说的是你在出报告图时或看供试品有关物质图谱时，对照主成分峰的峰高占图谱刻度的1/10。

对照溶液浓度是供试品溶液浓度的1%。
上面说的“满量程”是指检测器上的输出最大电平数，例如：岛津检测器最大电平输出1.0V,这就是岛津检测器满量程是1.0V，又例如：WATERS仪器，他的最大输出电平为2.0V,那么WATERS仪器满量程2.0V。因此，各个仪器满量程不一样.

补充一下：

供试品溶液浓度不需要确定，此方法是为了确定有关物质不能超过主成分的1/100，通过峰面积进行相对量比较。

实质上跟只进供试品主峰峰面积百分比大于99%理论上是一致的（前提是需保证主产物 浓度-峰面积为过0的直线）。

满量程的10％是说，如果你的对照品峰高是10mv，出谱图时 图谱高应设为100mv。

如果是进样浓度过大，由于主峰或者溶剂峰峰高较大，往往会看不见杂质峰

一定要注意

恩，过载了不是件好事情。 呵呵！！