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标题:【求助】关于线粒体提取

8s5g[使用道具]
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发表于 2013-8-19 17:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】关于线粒体提取

请问液氮保存2年的鼠肝脏及骨骼肌标本还能提取组织线粒体并进行相关检测吗？对线粒体内酶活性的检测会不会有影响呢？谢谢！新手上路。
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xueyouzhang[使用道具]
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发表于 2013-8-19 17:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

可以，对对线粒体内酶活性的检测没有影响
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yysr238[使用道具]
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发表于 2013-8-19 17:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

原则上新鲜提取的组织、细胞样本结果最好最为可信。
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发表于 2013-8-19 17:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

谢谢二位啊。那电镜下线粒体结构会不会有改变呢？明显不明显？ATP和丙二醛怕是检测不了了吧？
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u76mp[使用道具]
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发表于 2013-8-19 17:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

如果是简单的直接液氮保存，电镜下结构肯定会有明显的改变，我们做过与新鲜组织的比对。如果目的是提取高纯度的线粒体，则建议用新鲜组织或者专门的组织冻存液保存的组织。
但是活性测定我们没有做过。
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8s5g[使用道具]
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发表于 2013-8-19 17:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

天啊。我的课题就靠这标本了。各位觉得我还能不能从这些标本里边提取线粒体呢？听说完整率低，但是完整不完整对线粒体酶的测定有木有影响呢？很迷茫。。。
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dog002[使用道具]
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发表于 2013-8-19 17:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这种样本连线粒体染色都看不出形态，不要说电镜了。
电镜级别的线粒体多是新鲜的Hela细胞或者肝脏组织提取的。
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8s5g[使用道具]
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发表于 2013-8-19 17:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
那还能不能分离线粒体并做线粒体内酶测试呢？
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dog002[使用道具]
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发表于 2013-8-19 17:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我只能说可信度有限。什么样的样本都可以出结果的，只是说酶活性变化了多少已经不得而知。
Anyway，如果情况逼到没办法，照样做就是了。
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8s5g[使用道具]
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发表于 2013-8-19 17:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
线粒体的完整性会不会影响到提取呢？通俗点说就是，那些破破烂烂的线粒体分不分离得出来呢？
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