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首先,做实验刚一年,没结果不用着急,太正常了,现在需要的是心态,放松,然后多想想
思路本身应该没有太大问题,一方面可能是实验条件的问题,一方面是你的经验问题。所以,再做做是正常的。不过还是有些建议如下:
1。可以考虑换换试验手段。比如LC/MS,或者先去除高丰度蛋白等等。
2。也可以换换思路,比如利用已知的众多的信号通路抑制剂、激动剂去和目标药物联合用药,根据结果分析可能的通路。毕竟你的实验目的不是2D本身,而是找到信号通路对吧
3。至于你说的磷酸化也就是功能而不是量的改变是可能性非常大的,不过你现在需要的是普筛,所以抑制剂的方法可能会给你些idea,然后再去检测是量还是功能
4。也许2D或者LC/MS也可以分辨磷酸化改变,但是不熟悉,有知道的介绍下吧~~~
祝好运!