液相色谱

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昨天做HPLC方法学耐用性时，改变流速，发现峰高和峰面积都变化了很大~~~
流速增加，峰高降低，峰面积减少，流速减小则相反。之前看论坛帖子都说流速不会影响峰高，只会影响峰面积，但我这峰高也变化较大。
检测器是紫外灯，流动相是甲醇和水相（里面有庚烷磺酸钠和十二烷基硫酸钠，醋酸调PH）。求各位老师指导啊~~~

流速增加，相当于浓度降低，所以峰高会变低，面积会小。

C18柱用DMSO溶解样品做测试，不是长久之计，一时权衡倒可考虑。

我做的实验也是这样的，流速增加，峰面积和峰高都有所降低，峰高跟峰面积的变化是呈现一定的比例关系的。

是不是耐用性不好呢
峰高峰面积变化是正常的  不过不知道LZ说的很大是什么概念  我的印象中这个变化也不会很离谱的啊

紫外检测器属于浓度型检测器，如果进样量一定，样品浓度不变的话，流速增加峰面积减小属于正常，但是峰高应该不会有太明显的变化。楼主是否有其他条件的变化？

浓度型检测器在一定浓度范围（线性范围）内，响应值R（检测信号）大小与流动相中被测组分浓度成正比（R∝C）。浓度型检测器当进样量一定时，瞬间响应值（峰高）与流动相流速无关，而积分响应值（峰面积）与流动相流速成反比，峰面积与流动相流速的乘积为一常数。绝大部分检测器都是浓度型检测器，如：热导池检测器(TCD)、电子捕获检测器(ECD)、液相色谱法中的紫外-可见光检测器(UVD)、电导检测器与荧光检测器也是浓度型检测器。
除非条件改变或耐用性不行，不然峰高不会有明显变化。

我觉着是峰面积不变，峰高会发生较大的差异，这个我试过，同一个样品在不同流速下峰宽有较大的差异，这个差异是符合幂函数的。可能你积分的时候有部分基线没有积上去

流速变化会影响峰形和分离度的。流速越小越好，但是一般为了节省分析时间。都用比最佳流速大一点的流速。