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标题:【求助】wb电泳条带横向扩散，连成一直线

zhihui小新[使用道具]
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发表于 2013-8-31 10:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】wb电泳条带横向扩散，连成一直线

好几次跑都是这样，10ug蛋白总量上样，以前上样量是20ug的时候也没出现这一问题，求原因，谢谢


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zhihui小新[使用道具]
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 小中大

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发表于 2013-8-31 10:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

可能是胶的问题或者是一抗的稀释比例小吧
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gemei0115[使用道具]
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发表于 2013-8-31 10:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你没有电泳染胶看看啊？可能是电泳的问题吧？
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发表于 2013-8-31 10:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
可能是电泳上样的时候有些样品没完全沉到上样孔内，分散到电极缓冲液中了。
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zhihui小新[使用道具]
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发表于 2013-8-31 10:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

估计是电泳问题较大，感觉这几次跑浓缩胶都跑的特别快，maker在浓缩胶内就有分离迹象，不知是否和此有关，继续求助
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发表于 2013-8-31 10:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

样品盐浓度是不是偏高
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zhihui小新[使用道具]
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发表于 2013-8-31 10:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
想问一下是什么原因导致盐离子过高
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发表于 2013-8-31 10:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
可能离子柱洗下来峰靠后，盐浓度相对较高；
或者包涵体蛋白尿素溶解的；要不硫酸铵盐 看你试验条件了
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zhihui小新[使用道具]
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 小中大

不存在这些问题，我就是细胞收集后用裂解液裂解，不存在过离子柱这些步骤
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