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标题:[未解决]阿替洛尔的HPLC保留时间怪异?

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sagalong[使用道具]
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阿替洛尔的HPLC保留时间怪异?

求助高人,前段时间建立了HPLC测定阿替洛尔的色谱条件,甲醇和磷酸水为流动相,保留时间约为8min;过了段时间后,该条件就不能重复了。而且无论怎么调整流动相的比例和极性,阿替洛尔都在2.5min出峰,现已经证明不是色谱柱问题,也不是检测器问题,所用溶剂也没问题。这下不晓得该咋个办啦?还望高人指点迷津。
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  • miracle   2010-3-27 10:15  可用分  +1   已有朋友回复您的问题!
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woaifou[使用道具]
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楼主,时间变化这么大?
你怎么就肯定2.5min出峰的那个就是你要检测的物质?
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  • miracle   2010-3-27 10:16  可用分  +3   欢迎参与技术讨论!
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楼主,考虑一下PH的问题 !
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奶苶[使用道具]
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离子强度有关么        有没有换过其他色谱柱测定  看看有什么差别
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灰蓝之海sw[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 sagalong 于 2010-3-27 09:46 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
求助高人,前段时间建立了HPLC测定阿替洛尔的色谱条件,甲醇和磷酸水为流动相,保留时间约为8min;过了段时间后,该条件就不能重复了。而且无论怎么调整流动相的比例和极性,阿替洛尔都在2.5min出峰,现已经证明不是色谱柱问题,也不 ...

2.5min太快了吧!!要把它往后延才好!!
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chongwenmen[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 sagalong 于 2010-3-27 09:46 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
求助高人,前段时间建立了HPLC测定阿替洛尔的色谱条件,甲醇和磷酸水为流动相,保留时间约为8min;过了段时间后,该条件就不能重复了。而且无论怎么调整流动相的比例和极性,阿替洛尔都在2.5min出峰,现已经证明不是色谱柱问题,也不 ...

那就是泵的流速有问题了,测下流速,如果流速没有问题,我觉得问题还是出在色谱柱上面。色谱柱的C18链被打断不少,保留时间自认提前不少。
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  • miracle   2010-3-27 15:53  可用分  +3   欢迎参与技术讨论!
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sagalong[使用道具]
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回复 #6 chongwenmen 的帖子

流速应该是没有问题,因为测试了同时在研究的其他药物,色谱行为正常。
换了柱子试过,还是一样的问题。
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  • miracle   2010-3-28 10:53  可用分  +2   欢迎朋友回复交流!
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sagalong[使用道具]
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回复 #3 header 的帖子

因为随着样品浓度的不同,峰面积不一样啊。而空白也没用这个峰。
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sagalong[使用道具]
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回复 #2 woaifou 的帖子

因为随着样品浓度的不同,峰面积不一样啊。而空白也没用这个峰。
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sagalong[使用道具]
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回复 #3 header 的帖子

不好意思,刚点错了。我个人觉得应该不是pH的问题,因为大部分文献报道都要求是酸性条件下测定,大约在3左右,我的条件应该是符合的,而其也是以前考察好的色谱条件。
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