小中大经验:液相色谱手性柱使用经验
最近做一个不对称合成
最终要测产物的ee值,需要用液相手性柱分离测定
我用的是目前实验室比较常见的安捷伦 1100液相色谱
这里谈两点:
1、买手性柱
由于手性柱的适用范围比较小,价格昂贵,目前基本上是进口的,国内商家一般都是代理的,
所以要慎重。
买之前首先要依据文献看别人一般用的是什么型号的的柱子,
其次看国内有几家公司有这种型号的柱子,最好选能提供样品预分离服务的公司
这里推荐一家上海有机所内的公司,具体可以摆渡下
服务不错!
2、分离
产物后处理后(无机盐等一定要处理干净),最好在普通C18 反相柱上测定,看下纯度,因为手性柱比较娇贵的,东西杂了不好分。
由于手性柱是正相柱,也就是说柱子本身是极性的,流动相主要是非极性溶剂加极少量极性溶剂(一般选正己烷或正庚烷和异丙醇等,需自己配),另外溶剂水分含量要求很低,我们用的是国外进口分装的色谱纯试剂,流速不宜太快,产物出峰时间30~60min之间比较合适。
还有一点就是可以利用安捷伦1100可以控制柱温的条件,适当降低柱温可以提高分离度。