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标题:[未解决]关于注射用水溶性维生素的测定

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yuanyu002[使用道具]
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关于注射用水溶性维生素的测定

请教:注射用水溶性维生素中关于烟酰胺、等5项的液相检测方法其标准为烟酰胺、盐酸吡哆辛、硝酸硫胺、泛酸钠、维生素C钠和核黄素磷酸钠 照高效液相色谱法(中国药典1995年版二部附录Ⅴ D)测定。
  色谱条件与系统适用性试验 用氨基键合多孔硅胶为填料,以(0.02mol/L)磷酸二氢钾溶液-乙腈(27:73),用10%盐酸溶液调节pH为5.3的溶液为流动相,流速为1.5ml/min,检测波长:烟酰胺、盐酸吡哆辛、硝酸硫胺、泛酸钠、维生素C钠为214nm;核黄素磷酸钠用萤光检测λEX=445nm、λEM=520nm。各组分的分离度应符合要求。
  对照品溶液的制备 (1)取烟酰胺对照品约150mg、硝酸硫胺对照品约12mg、盐酸吡哆辛对照品约18mg、泛酸钠对照品约62mg,分别精密称量置50ml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度摇匀,精密量取2ml置50ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,即为对照品溶液(Ⅰ),此溶液置暗处充氮气于零下20℃可保存1个月。
(2)取维生素C钠对照品约425mg、核黄素磷酸钠对照品约19mg,精密称定,置50ml量瓶中加水溶解并稀释至刻度摇匀,精密量取2ml置50ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀即为对照品溶液(Ⅱ),此溶液必须临用新鲜配制,并于零下20℃保存,用前放置至室
温。
  等容混合对照品溶液(Ⅰ)和对照品溶液(Ⅱ)即为对照品溶液。
  供试品溶液的制备 取装量差异项下的内容物约2瓶重量,精密称定,置100ml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取15ml置200ml量瓶中,用流动相稀释至刻度。
  测定法 取对照品溶液和供试品溶液各10μl,交替注入液相色谱仪,测定,用外标法计算各组分含量,即得。
目前存在问题用紫外检测的分不开5种组分,大家有什么好办法,谢谢
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  • miracle   2010-4-21 11:59  可用分  +1   已有朋友回复您的问题!
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woaifou[使用道具]
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1、为什么要用氨基柱呢?
2、试过调调流动相的比例吗?
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  • miracle   2010-4-21 11:59  可用分  +3   欢迎参与技术讨论!
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LUMGR[使用道具]
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可以理论塔板数,最简便的方法,先换一根长柱子试试.
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fence-straddler[使用道具]
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回复 #1 yuanyu002 的帖子

既然是氨基柱,试着增大乙腈的比例以增强保留,从而改善分离度。
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yuanyu002[使用道具]
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增大乙腈比例已经试过用C18的柱子也试过都不能分开,现在等250柱子回来再试试,大家有没有什么别的流动相可以试试的
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nancy7752[使用道具]
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你的对照溶液分开没有?
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用紫外检测的分不开5种组分?不是用液相吗,好点的色谱柱试试,最好说明如何分不开。
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生活eesf[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 yuanyu002 于 2010-4-23 12:41 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
增大乙腈比例已经试过用C18的柱子也试过都不能分开,现在等250柱子回来再试试,大家有没有什么别的流动相可以试试的

考虑用3相比例的流动相试试
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  • miracle   2010-4-23 15:16  可用分  +3   感谢您对论坛的支持!
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健康千万家[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 yuanyu002 于 2010-4-23 12:41 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
增大乙腈比例已经试过用C18的柱子也试过都不能分开,现在等250柱子回来再试试,大家有没有什么别的流动相可以试试的

我没怎么明白你的意思,核黄素磷酸钠用萤光检测λEX=445nm、λEM=520nm,烟酰胺、盐酸吡哆辛、硝酸硫胺、泛酸钠、维生素C钠为214nm

你用的是什么检测波长?

214nm?

核黄素磷酸钠有没有处理?
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yuanyu002[使用道具]
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现在的问题是对照也没有分开,回复健康千万家 现在检的是烟酰胺、盐酸吡哆辛、硝酸硫胺、泛酸钠、维生素C钠为214nm
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