小中大我那个时候的重点是槲皮素和山奈素,所以,先要把总黄酮提取出來,然后跑板,看看有没有这两种物质,然后就进行过柱子了~~~
首先,你要配出槲皮素和山奈素的对照品,然后分别过柱子,测出它们各自的保留时间,这一步很重要!当时我们遇到的问题是我们用的是跑板的对照品,浓度太高,我的导师稀释了 100倍还是量太大,最后我稀释了1000倍才跑出了像样的峰。还有,我们用的色谱甲醇杂质量还是蛮大的,绝对会出现杂质峰,要注意区分。
接着,把你提取的东西稀释稀释再稀释,我是稀释了100倍,然后过柱子,然后跑就是了。
具体跑多少时间是根据你的对照品的保留时间决定的,把最长保留时间的往后延长10分钟就差不多了,那就是你要过柱子的时间。
我那个时候记得40分钟出山奈素,所以我跑了50分钟。一共跑了三张图。
接着,按照槲皮素和山奈素的保留时间找到他们的峰,算出峰面积。
打印你的图,如果你能把药典从图书馆带出来的话,你就不用打印了。我只能带着图去图书馆,查你做的中药的指纹图谱,再根据你的数据确定质量。
做这些的前提条件是你一定要先在药典上查好了需要跑什么。