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标题:[未解决]指纹图谱,怎么样的数据就算是好的?

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
luffygonww[使用道具]
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指纹图谱,怎么样的数据就算是好的?

怎么样评价一张色谱图分离的好坏?我分离的是中药样品,要做中药的指纹图谱,怎么样的数据就算是好的呢?分离度高?时间短?出峰数多?还是其它的什么?
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popshengu[使用道具]
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还是分离度吧
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zxlyid[使用道具]
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3
 
我当时实习的时候做的是黄酮,可以说浓度非常高,导致无关峰出现很多而且量非常大,而我们当时所需要的只是槲皮素和山奈素两个峰,结果都没有得到。
关键是看你要哪几个峰,然后单测几个成分的保留时间,最后确定你的时间。做中药指纹图谱还是要看你的关键峰有没有,接着是峰面积是否达到要求,当然对分离度也有一定的要求。
至于峰数的问题看你的提取了,你不可能不跑板直接去过柱子吧?
中药的峰面积范围给的非常大的,因为其中成分含量的确是非常的……你所有的全部出来了,接下来你肯定要跟着药典进行对比图谱吧,而且你绝对不会只有一张图谱。所以,平均着看问题吧~~~
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uwku58h[使用道具]
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请问上一楼的,能说得更具体一些吗?你是怎么做一个中药的指纹图谱的呢?
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zxlyid[使用道具]
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5
 
我那个时候的重点是槲皮素和山奈素,所以,先要把总黄酮提取出來,然后跑板,看看有没有这两种物质,然后就进行过柱子了~~~
首先,你要配出槲皮素和山奈素的对照品,然后分别过柱子,测出它们各自的保留时间,这一步很重要!当时我们遇到的问题是我们用的是跑板的对照品,浓度太高,我的导师稀释了 100倍还是量太大,最后我稀释了1000倍才跑出了像样的峰。还有,我们用的色谱甲醇杂质量还是蛮大的,绝对会出现杂质峰,要注意区分。
接着,把你提取的东西稀释稀释再稀释,我是稀释了100倍,然后过柱子,然后跑就是了。
具体跑多少时间是根据你的对照品的保留时间决定的,把最长保留时间的往后延长10分钟就差不多了,那就是你要过柱子的时间。
我那个时候记得40分钟出山奈素,所以我跑了50分钟。一共跑了三张图。
接着,按照槲皮素和山奈素的保留时间找到他们的峰,算出峰面积。
打印你的图,如果你能把药典从图书馆带出来的话,你就不用打印了。我只能带着图去图书馆,查你做的中药的指纹图谱,再根据你的数据确定质量。

做这些的前提条件是你一定要先在药典上查好了需要跑什么。
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DragonsABC[使用道具]
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做色谱必须要进行稀释这一步吗?不稀释直接用原液不可以打吗?
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奶苶[使用道具]
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多数是要稀释的,原液很容易变成平头峰啊。
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zxlyid[使用道具]
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8
 
不稀释的话,到时候峰太大了,而且每个峰之间的影响极大的……
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hplcangel[使用道具]
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一是分离度,二是峰形尖锐程度
当然出峰时间不要太长
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