小中大【求助】明胶酶谱结果分析
检测细胞上清中MMP2和MMP9的活性变化，使用明胶酶谱法检测，明胶浓度0.1％（1mg/ml），浓缩胶5％，90V电泳；分离胶10％，150V电泳。
细胞上清获取：无血清培养24小时，弃上清，加入等体积（500ul）含有不同药物浓度的无血清培养液，作用24h、48h后收集上清。
上样：取同等体积（50ul）上清，分次加入胶孔，浓缩分离；
接下按明胶酶谱常规进行实验操作。
结果如下图：
问题：
1. 图中怎么只有一条明显的带（MMP-2或proMMP-2），而没有MMP-9？
2. 细胞培养上清是按等体积加入或是按等蛋白量加入？国外文献是等体积。
3. 上样量分次加入（间隔时间短）是否可以？
