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标题:【求助】浓缩胶

12xunmei[使用道具]
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发表于 2013-10-7 13:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】浓缩胶


我的样品在浓缩胶里总是浓缩不好,浓缩不成一条线,大概有0.3毫米那么粗,我师兄说浓缩不好是温度太低的原因,可是有一个人他同时跟我跑电泳,他的就很好,不过他用的bio-rad的仪器，难道是我配的胶的问题吗？
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ii077345[使用道具]
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发表于 2013-10-7 13:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
可能和样品浓度太高有关吧,有的时候样品太粘稠浓缩胶有弥散的感觉
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yes4[使用道具]
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发表于 2013-10-7 13:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

也可能是你的样品处理有问题把
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abc816[使用道具]
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发表于 2013-10-7 13:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

和样品有关，我的样品经常在浓缩胶里并不成一条直线，但加大电压到分离胶后就成一条线了。
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12xunmei[使用道具]
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发表于 2013-10-7 13:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我的分离胶电压80v,浓缩胶100v.电压不低啊.我估计是样品的浓度有关,大家都把样品的浓度调成什么浓度啊
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duoduo[使用道具]
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发表于 2013-10-7 13:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
对于SDS-PAGE gel 垂直电泳们根据电流进行电泳。mini gel 1枚stacking gel 10mA,running gel 20mA,2枚成倍。standard gel1枚stacking gel 20mA,running gel 40mA。可根据需要加快电流时间，但要防止产热玻璃破碎。
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发表于 2013-10-7 13:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

分离胶电压80v,浓缩胶100v，电压条件可以了，不知道你染色出来的条带清晰不？
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发表于 2013-10-7 13:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我有和他类似的问题！我是在浓缩胶里很好，但是到了分离胶，越跑越宽，不规则弥散


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发表于 2013-10-7 13:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
而且，跑完没有明显的条带，从上到下拖尾很严重，不知道是怎么回事～～～谁能指教一二啊！


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rxcc33[使用道具]
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发表于 2013-10-7 13:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
从第一张图看染料似乎多了，你上样量很大吧，染料多倒也不影响分离效果，即使没有浓缩成一条线也没关系。从第二张图看分离效果不好，或者是样品有降解，你跑个marker看看分离效果如何，现在不知道你用的是什么配比和浓度的胶，也不知道是什么样品及其浓度，如果是浓度很大的样品，可尝试稀释后再加样品缓冲液。泛泛的分析原因，不知有没有帮助。
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