蛋白质与蛋白组学 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】用碧云天BCA试剂盒测蛋白质浓度，用酶标仪...

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 13  1/2 12››
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【求助】用碧云天BCA试剂盒测蛋白质浓度，用酶标仪...

free[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 71299
精华 0
积分 298
帖子 276
信誉分 100
可用分 2226
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-8-24
状态 离线
1

发表于 2013-10-9 11:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】用碧云天BCA试剂盒测蛋白质浓度，用酶标仪...


BCA试剂盒测蛋白质浓度，用酶标仪，请问怎样根据标准曲线计算
顶部
u234[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77031
精华 0
积分 691
帖子 1081
信誉分 100
可用分 6196
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-12
状态 离线
2

发表于 2013-10-9 11:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们实验室有个专门的软件 但我想EXCEL应该也可以 你可以试试
顶部
kuohao17[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77299
精华 0
积分 559
帖子 716
信誉分 101
可用分 4453
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-15
状态 离线
3

发表于 2013-10-9 11:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

可以用Origin啊，很好的软件。
顶部
taoshengyijiu[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 77450
精华 0
积分 467
帖子 614
信誉分 100
可用分 3876
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-17
状态 离线
4

发表于 2013-10-9 11:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

一般是测量od562nm的波长，用excel先作出散点图，然后，点右键，添加趋势，即可给出曲线方程。
顶部
remenb[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75236
精华 0
积分 631
帖子 941
信誉分 100
可用分 5531
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-20
状态 离线
5

发表于 2013-10-9 11:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

用SPSS 很好用的 我们实验一直这样做的
先做标准曲线
以蛋白标准的量为自变量 吸光度为因变量
得到一个方城y=a+bx 然后x=(y-a)/b
根据已知的吸光度和方程 用EXCEL一拖 就可以了
非常方便
顶部
moonlight45[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 79769
精华 0
积分 487
帖子 654
信誉分 100
可用分 4096
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-15
状态 离线
6

发表于 2013-10-9 11:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

酶标仪不是直接可以打出一个图来吗？有标准曲线，然后有样品的吸光度值，直接在曲线上找相应的浓度值，不是这样吗？我还没做过 ，但感觉好像是这样，难道我一直都想错了？还得用软件分析？多谢各位解迷
顶部
any333[使用道具]
五级
Rank: 5Rank: 5


UID 76446
精华 1
积分 1533
帖子 2542
信誉分 102
可用分 13711
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-5
状态 离线
7

发表于 2013-10-9 11:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

Excel就足够了，没有那么复杂。酶标仪读出标准蛋白和样品OD值后，用空白对照的OD值对所有蛋白的OD值进行校正；
再用已知的蛋白标准品浓度与校正后的对应OD值在Excel中做出标准曲线，注意添加趋势线时有多选框，把曲线方程和R平方值选中，就可以得到标准曲线方程；
最后将校正后的样品OD值代入上述方程中，即可得出样品的浓度。

注意：1. R平方值至少要有2个9，如0.991；
2. 样品OD值最好落在标准曲线中部；
3. 测得的蛋白浓度不是绝对浓度。
顶部
owanaka[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76900
精华 0
积分 395
帖子 510
信誉分 100
可用分 3337
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-10
状态 离线
8

发表于 2013-10-9 11:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
标准曲线的空白一定是0吗？ 加蛋白量是从0，1，2，4....ml开始的，但我的第一个加0ml蛋白的OD值都不是零？
顶部
3N4G[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 74178
精华 0
积分 408
帖子 536
信誉分 100
可用分 3461
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-7
状态 离线
9

发表于 2013-10-9 11:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 owanaka 于 2013-10-9 11:18 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
标准曲线的空白一定是0吗？ 加蛋白量是从0，1，2，4....ml开始的，但我的第一个加0ml蛋白的OD值都不是零？

调零后不就是0了吗？哈哈
顶部
fei1226com[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79957
精华 0
积分 599
帖子 898
信誉分 100
可用分 5286
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-18
状态 离线
10

发表于 2013-10-9 11:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
"Excel就足够了，没有那么复杂。酶标仪读出标准蛋白和样品OD值后，用空白对照的OD值对所有蛋白的OD值进行校正；
再用已知的蛋白标准品浓度与校正后的对应OD值在Excel中做出标准曲线，注意添加趋势线时有多选框，把曲线方程和R平方值选中，就可以得到标准曲线方程；
最后将校正后的样品OD值代入上述方程中，即可得出样品的浓度。

注意：1. R平方值至少要有2个9，如0.991；
2. 样品OD值最好落在标准曲线中部；
3. 测得的蛋白浓度不是绝对浓度。 "

我觉得是完全正确的啊 我们就是这么做 其实很简单 不用什么软件的
顶部
 13  1/2 12››