小中大【求助】pET22b 诱导表达问题 加入IPTG工程菌生长很慢
我将目的基因通过BamH1 和Hind111，插入pet22b，目的基因有自己的起始和终止密码子，将重组质粒导入宿主菌EcoliBL21a(DE3)，加入IPTG 后打算诱导，可是 4h,后准备收集菌体，发现菌生长很缓慢，与未诱导的相比，菌浓基本和诱导之前差不多，延长诱导时间到7h，菌弄才有所增加，破碎细胞收集粗酶液做SDS,发现诱导过得样品和空载体诱导的条带一样，并未有过表达的蛋白，而之前将目的基因连接到Pet30a中，导入EcoliBL21a(DE3)，诱导的话菌体都能正常生长，请大家帮忙看看，我刚做原核表达，希望高手多多指点！
下图，从左到右，1为IPTG诱导的空载体EcoliBL21a(DE3)--pET22B,2--Maker3---5为IPTG诱导含目的基因的工程菌细胞裂解上清，IPTG浓度分别为0.4，0.6,0.8 。
