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标题:【讨论帖】蛋白版畅谈自己课题，欢迎参与

wmp1234[使用道具]
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发表于 2013-10-22 15:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【讨论帖】蛋白版畅谈自己课题，欢迎参与

我先说说我的：

肺炎衣原体CPAF原核表达、免疫活性研究及其单克隆抗体的制备。

1、CPAF原核表达

通过基因克隆的方法，将重组载体PGEX6P/2转化大肠杆菌BL21中，在合适的条件下诱导其大量表达；

2、CPAF重组蛋白纯化

蛋白以包含体形式存在，使用亲和层析法纯化；

3、免疫活性的研究

重组蛋白免疫BALB/C小鼠，4w后采血ELISA测血清效价；GST单抗western－blot鉴定蛋白特异性；

4、重组蛋白免疫BALB/C小鼠，常规免疫后进行融合试验，融合成功后经三次ELISA确定阳性克隆；扩大培养后免疫BALB/C小鼠大量生产；纯化免疫后得到的腹水；

5、与重组蛋白、肺炎衣原体标准株western－blot；与沙眼衣原体、鹦鹉热以原体进行免疫荧光确定单抗与其他以原体无交叉反应；检测临床诊断为肺炎衣原体阳性感染病人的外周血单核淋巴细胞（MIF)并与美国进口肺炎衣原体单克隆抗体检测结果比较。
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发表于 2013-10-22 15:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我先说说我的：

肺炎衣原体CPAF原核表达、免疫活性研究及其单克隆抗体的制备。

1、CPAF原核表达

通过基因克隆的方法，将重组载体PGEX6P/2转化大肠杆菌BL21中，在合适的条件下诱导其大量表达；

2、CPAF重组蛋白纯化

蛋白以包含体形式存在，使用亲和层析法纯化；

3、免疫活性的研究

重组蛋白免疫BALB/C小鼠，4w后采血ELISA测血清效价；GST单抗western－blot鉴定蛋白特异性；

4、重组蛋白免疫BALB/C小鼠，常规免疫后进行融合试验，融合成功后经三次ELISA确定阳性克隆；扩大培养后免疫BALB/C小鼠大量生产；纯化免疫后得到的腹水；

5、与重组蛋白、肺炎衣原体标准株western－blot；与沙眼衣原体、鹦鹉热以原体进行免疫荧光确定单抗与其他以原体无交叉反应；检测临床诊断为肺炎衣原体阳性感染病人的外周血单核淋巴细胞（MIF)并与美国进口肺炎衣原体单克隆抗体检测结果比较。
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qiangren789[使用道具]
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发表于 2013-10-22 15:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我也参与一个：
课题：Calvin循环多酶复合体的纯化与鉴定
1、通过一些生化方法（分子筛层析，离子交换层析)纯化这一复合体
2、通过各种电泳方法（PAGE、SDS-PAGE）鉴定这一复合体组分及其分子量
3、对其结构进行分析（目前还没有做到这里，还没有想到好的方法呢）
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junjie05[使用道具]
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发表于 2013-10-22 15:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

积极参与：
我的课题是关于蛋白质芯片方面的，目前做自身免疫性抗体检测芯片的研制．
主要用于检测抗15~18种自身抗原抗体的检测，包括ANA谱，ccp,CENP-B,核小体等等．
有些抗原可自己制备，如dsDNA等，有些需要重组表达，如CENP-B等，有些需要直接购买。
目前的工作是在已有的基础上做的（师姐做过），但仍存在有很多问题需要解决。
希望有相似课题的战友相互帮助，共同进步！
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taoshengyijiu[使用道具]
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发表于 2013-10-22 15:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我也来一个：
主要从海洋药用贝类资源中纯化鉴定具有抗肿瘤作用的 蛋白或多肽
1 ，蛋白的提取，分离,凝胶柱层析，超滤，FPLC等
2 ，活性检测；主要是细胞筛选了
3 ，蛋白鉴定，主要是MS ，以及N末端测序
4 ，普遍的检测手段如，BCA，SDS-PAGE
希望大家多多交流！
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发表于 2013-10-22 15:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我也来一个
课题是与抗菌肽相关
1 预测已有抗菌肽的共有的特点，如二级结构，氨基酸组成
2 分析氨基酸组成与抗菌肽抗菌活性及溶血性之间的关系
3根据分析结果，合成纯度大于95的抗菌肽进行抗菌活性和溶血性的分析。
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发表于 2013-10-22 15:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

发现一段序列，在蛋白N端可以促进其在大肠杆菌中表达，构建没有这段序列的蛋白不能表达，或表达量很小，正在努力研究
1。截断该序列，构建到蛋白中，看看怎么样
2。或突变几个氨基酸，具体的还没有想好，请大家指点
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cj_mondy[使用道具]
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发表于 2013-10-22 15:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我的课题是关于病毒的受体鉴定方面的：
1. 酵母表达病毒的表面膜蛋白；
2. 以病毒易感的一种神经细胞膜蛋白建立噬菌体展示文库，利用表达的蛋白筛选病毒在这种神经细胞膜上的受体；
3. 通过RNAi和免疫组化鉴定受体的作用与机体内的分布。

斑竹：鼓励一下新战友，加分呀！呵呵！
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发表于 2013-10-22 15:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

相关疾病：
心力衰竭
冒个泡:我的课题是研究小鼠心肌肥厚和心衰过程中心肌细胞上一种钾离子通道的亚单位KV4.2的变化情况.大致步骤:
1动物病理模型的建立
2模型成功与否检测
3WESTERNBLOT检测蛋白水平的改变
4PCR检测mRNA水平的改变
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ROSE李[使用道具]
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 小中大
相关疾病：
肿瘤
我的研究课题是maspin对HDAC的抑制作用，及对肿瘤的影响。
采用的技术手段有siRNA,chip,ip,gst-pull down,real time-rt-pcr,等
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