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标题:【求助】在进行血液蛋白质组学研究时，如何处理血液...

966735obeng[使用道具]
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发表于 2013-10-25 20:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】在进行血液蛋白质组学研究时，如何处理血液...


我刚刚涉足蛋白质组学研究，想做一些比较血浆蛋白质组学的工作，标本需在临床上长期收集，集中处理，请问有过这方面研究经验的朋友指点一下：我对采集的血液标本如何保存、处理为好，是否需除去白蛋白和球蛋白啊？谢谢了！
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发表于 2013-10-25 20:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
去除血清中的白蛋白，，同时对血清中免疫球蛋白、脂类和糖类的去除，是提高血清双向电泳蛋白质上样量及分辨率的关键因素。我们用CNBr-activated sephorase 4B 与羊抗人的白蛋白抗体相连接后，与血清混合进行亲和吸附去除血清中白蛋白的方法，结合超速离心除去血清中的脂类和糖类，结果很好
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发表于 2013-10-25 20:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
血液蛋白质组？第一次听说。
是不是指的血清或血浆蛋白质组呢？
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扫雷军kuzi[使用道具]
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发表于 2013-10-25 20:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
一点小建议：
1.支持楼上的，将样本进行脱盐，脱脂。
2.买些试剂盒，去除大量的球蛋白和白蛋白。避免干扰其它的低丰度甚至高丰度蛋白.AMERSHAM的试剂盒较好，不过不便宜。
即使这样，你的2D图谱可能还是没有细胞或组织蛋白的图谱好看。这是体液蛋白组学的特征。
3.样本最好经过各种处理后（只等上样等电聚焦了），分装冷冻保存再－70度或液氮中，注意要避免反复冻融
祝你好运！
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966735obeng[使用道具]
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发表于 2013-10-25 20:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
谢谢大家的宝贵意见，这些建议对我真的很有用。楼上的几位象是有这方面的经验，能发一些相关的资料给我吗？我是指关于血浆蛋白质组学方面的文章，我还没怎么查到这方面的全文。
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woshituzhu[使用道具]
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发表于 2013-10-25 20:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我也要做血液方面的工作，想请教楼上高手，研究血浆蛋白和血清蛋白哪个更有代表性？样品前处理方法一样吗？有没有什么需要分别注意的？
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发表于 2013-10-25 20:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

相关疾病：
肝硬化
有人用过默克公司的除白蛋白和免疫球蛋白的试剂盒。我要做肝硬化和肝癌血清蛋白质组学，大家有做过这方面的实验的请给予指点。谢谢！
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68943512yao[使用道具]
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发表于 2013-10-25 20:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我在做有关肝炎方面的蛋白质组学研究工作。由于肝脏穿刺标本量少，而较大的标本又不易获得，所以考虑从血液方面着手进行研究。

但是这方面的文献国内报道较少，而国外的不易查到。可否请楼上的各位同仁帮帮忙，发一些相关的资料（如果是全文更好）给我好吗？有关血浆蛋白质组学方面的文章。
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发表于 2013-10-25 20:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

据我所知，国内外研究主要是是血清标本，首先，去除了纤维蛋白；。其次，从基础实验上讲，以往对血清标本的处理比较成熟。进行2D电泳的血清标本需进行预处理，而进行SELDI的血清标本直接点样，不需预处理。
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changlhsyo[使用道具]
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发表于 2013-10-25 20:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我也是一名新手，请问第二层的stillwater,使用超滤管有什么注意事项，我用了一次，由于没有角转子离心机，就用的水平的，结果回收后滤膜好象 破了一样，现在想可能是析出的蛋白质吧，能帮忙给讲讲做超滤的要领吗 ？
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