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标题:【求助】拜托高手指点：胶与玻璃板间有大气泡！？

mickeylin[使用道具]
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发表于 2013-10-26 22:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】拜托高手指点：胶与玻璃板间有大气泡！？

相关疾病：
错位
我最近刚刚开始western blot，现在的问题是：用夹子夹好玻璃板，灌胶，插梳子，拔梳都正常，但是在把胶装入电泳槽时，一旦松开夹子，胶与玻璃板间就出现大的气泡，竟然两块板竟然活动错位，电泳时跑不动！
新手实在不知问题出在哪里了，拜托高手指点！
多谢！·
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12xunmei[使用道具]
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发表于 2013-10-26 22:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

电泳前要先赶掉气泡，特别是电极之间不能有气泡，否则会很难看的。
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utt0989[使用道具]
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发表于 2013-10-26 22:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不知道你是怎么做胶的啊？我们实验室从没见过这种情况。你封边是怎么做的？下边用琼脂糖封，两边用凡士林将两块玻璃板和中间的那个条条粘在一起，去掉夹子也不会有问题啊，玻璃板和胶契合的很紧，跑完胶需要用手术刀背轻轻拗，才能分开，不可能出现气泡的。
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yes4[使用道具]
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发表于 2013-10-26 22:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我碰到过，可能跟玻璃的材质有关。但是那样的所谓气泡不影响跑胶的呀，你装入电泳槽后压紧就没有问题了。我觉得你的问题不出在玻璃板和胶的空隙上，往别的方面找找吧。不知道你的仪器什么样子，没法细想。
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mickeylin[使用道具]
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发表于 2013-10-26 22:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
谢谢大家！
我用的是橡胶条封胶，倒是从来没有漏过。今天我把APS、TEMED的浓度提高了，希望能有改善。
另外，下次打算有气泡也跑跑看，谢谢！
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了了[使用道具]
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发表于 2013-10-26 22:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你用的是Bio-rad的玻板吗?
应该是玻璃本身的问题,玻璃两边的垫块是否平整呢?玻璃之间结合应该紧密,平时也要很爱护它们才行的.
有气泡最好还是不要跑哦,如果很大又在重要的位置上可能就影响观察结果了.
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taoshengyijiu[使用道具]
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发表于 2013-10-26 22:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

以前我也出现过这种情况，一般就是玻璃板没有擦拭干净！其他的方面出现这种情况比较少见。现在我都是先用洗涤剂洗干净玻璃板，然后用酒精棉擦拭干净，放到烘箱里烘干，等没有水珠后再做胶。
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birdfish[使用道具]
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发表于 2013-10-26 22:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我用的是六一厂的板，今天还在试，板的确有些老化，又没钱买新的，争取就用它作出来吧，谢谢大家！及时向大家汇报成果！
大家的热情真令偶感动啊，55555
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fsdd817[使用道具]
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发表于 2013-10-26 22:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我用的也是六一的小型垂直电泳槽，我每次在使用之前都会用酒精棉球擦板子，但有时也会出现这样的情况（最近这段时间出现的）：把板子取出来的时候没有关系，一取边条就会钻进一些小气泡。似乎不影响跑胶，不过我也还是不喜欢板子和胶之间有气泡，我打开板子把胶和板子一起浸没在蒸馏水里重新合上板子，气泡就没有了。后来我觉得这样太麻烦，所以是在取边条之前先把夹着胶的板子浸没在蒸馏水，然后再取下胶条，这样就没有气泡进去了。跑胶的效果都还是不错的。
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yysr238[使用道具]
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发表于 2013-10-26 22:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

如果正常制胶，一般与玻板没有很大关系。制胶后移动玻板如果直接用手，要注意手指要稍微用一点力，防止玻板分离；如果用小型玻板，可以用一只大号票夹子先夹住玻板上部，然后松开制胶器的夹子，提住票夹轻轻提起玻板玻板，放置电泳槽上固定好玻板后，再取下票夹。如果玻板是用胶条封边的，在取下胶条时，不能松开票夹。
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