【求助】DH10Bac 感受态制备

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标题:【求助】DH10Bac 感受态制备

nut6694[使用道具]
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发表于 2013-10-27 12:01 资料个人空间短消息加为好友

小中大

DH10Bac 感受态制备时需不需要加抗生素？如果需要是什么，浓度多少

98776langtao[使用道具]
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发表于 2013-10-27 12:01 资料个人空间短消息加为好友

小中大

感受态制备应该不加抗生素吧。DH10Bac也是大肠杆菌的一种啊，我觉得依照平常制备感受态的方法制就可以了

04906[使用道具]
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发表于 2013-10-27 12:02 资料个人空间短消息加为好友

小中大

DH10Bac是杆状病毒表达系统用的一个菌株吧？我印象中这个菌株是携带有一个质粒的。但不记得这个质粒是以溶原状态存在还是以游离状态存在。楼主请仔细看Invitrogen的说明书把这点搞清楚。如果携带的质粒是以游离状态存在的话，那我觉得制备感受态的时候，培养细菌的培养基里肯定要加抗生素，当然制备溶液比如CaCl2溶液中就没有必要加了。

DNA[使用道具]
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发表于 2013-10-27 12:02 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 04906 于 2013-10-27 12:02 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

DH10Bac是杆状病毒表达系统用的一个菌株吧？我印象中这个菌株是携带有一个质粒的。但不记得这个质粒是以溶原状态存在还是以游离状态存在。楼主请仔细看Invitrogen的说明书把这点搞清楚。如果携带的质粒是以游离状态存 ...

严重赞同!
不过,DH10Bac是携带有两个质粒的,都是游离状态存在.
培养细菌的培养基里要加两种抗生素. 感受态细胞制备方法和别的细菌一样.

qiangren789[使用道具]
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发表于 2013-10-27 12:03 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我做DH10Bac制备感受态细胞时没有加任何抗生素

lixi559[使用道具]
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发表于 2013-10-27 12:04 资料个人空间短消息加为好友

小中大

感受态细胞本身是没有抗性的，在转化进载体以后才显示载体的抗性，因此，制备感受态细胞时是不需要加抗生素的。

mod=8048[使用道具]
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