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标题:【求助】细胞核蛋白WB选用什么内参好啊？

宁小胡[使用道具]
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发表于 2013-10-31 16:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】细胞核蛋白WB选用什么内参好啊？


刚开始做WB，想找下细胞核蛋白的内参。请各位高手给指指路。
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H2O[使用道具]
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发表于 2013-10-31 16:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

histone 2A, LaminB同时用。因为histone2A定位于染色质，LaminB定位于核纤层。二者共用可更好地判定细胞核提取是否完整。
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89tongzijun[使用道具]
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发表于 2013-10-31 16:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请问你细胞核蛋白在做sds-page 时用的是连续电泳还是不连续的，胶的浓度是多少
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89tongzijun[使用道具]
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发表于 2013-10-31 16:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
有没有跑的很漂亮的核蛋白PAGE胶
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lxh031[使用道具]
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发表于 2013-10-31 16:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

二楼是正解，我们实验室也是这样做的 ，很多文献支持。
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89tongzijun[使用道具]
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发表于 2013-10-31 16:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

有没有跑的很漂亮的核蛋白PAGE胶
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发表于 2013-10-31 16:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

为什么我用核蛋白跑的胶歪歪扭扭，张牙舞爪的？跑到最后拖着一条条长长的带，你们有没有遇到这种情况啊？都是怎么提核蛋白的？如果核蛋白没提好会不会影响跑胶呢？
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zwsyrt[使用道具]
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发表于 2013-10-31 16:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我也遇到过同样的问题，
我想，如果你看别的目的蛋白时条带正常，那应该不是胶或者buffer的问题。
我当时是减少上样量，加长封闭时间，每次冲洗时都10min,3次，还有降低一、二抗的稀释比率和反应时间之后条带清晰了点。
关于这个问题我也曾向园里的各位战友们求助过，也上了扫描的胶卷，你可以查我的ID看看。
希望对你有所帮助。
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bring[使用道具]
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发表于 2013-10-31 16:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

western 新手,请问做线粒体蛋白WB选用什么内参好啊？
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youyou99[使用道具]
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发表于 2013-10-31 16:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请问histone 2A, LaminB怎么同时用啊？

还有我想问的是细胞核蛋白的内参不是该用PCNA吗？

急！！！！万分感谢！！！
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