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标题:【求助】Protease Inhibitor Cocktail sigma 用法求助

owanaka[使用道具]
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发表于 2013-10-31 20:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】Protease Inhibitor Cocktail sigma 用法求助

我买的是sigma的Protease Inhibitor Cocktail ，1ml，请问100µL的裂解液中应该加多少啊？我找了半天都没用量。请用过的朋友指点一下，谢谢！
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Ao7[使用道具]
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发表于 2013-10-31 20:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #1 owanaka 的帖子

我看到过说明应该是100×母液
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ROSE李[使用道具]
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发表于 2013-10-31 20:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们这边也有买Sigma的PIC,不过买来的是固体,然后溶解后，都是50×分装的,我们现在买的是Roche的是片剂,它推荐的是10×的,但我一般用40×分装问题也不大.
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owanaka[使用道具]
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发表于 2013-10-31 20:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

哦，谢谢。Roche的我们也用，说明书上说1片用于10ml的提取物，将1片溶于2ml双蒸水中，那就是每ml提取物用200微升的蛋白酶抑制剂，对吗？
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ROSE李[使用道具]
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发表于 2013-10-31 20:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
Roche的一片工作浓度是10ml,不过说明书上推荐是配成10*的
你所说的也是对的，不过你配的是5*的,稍微太稀了点,而且你用的是DDW稀释的，太稀容易导致你的裂解液浓度下降(800ul lysis buffer+ 200ul 含水PIC使lysis buffer的效果下降，不过如果你的lysis buffer是2* SDS-loading buffer的话也就不在乎这么点浓度的变化了 ).推荐10*以上的浓度作为stock solution,至少我的40*感觉还不错
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owanaka[使用道具]
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发表于 2013-10-31 20:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #5 ROSE李 的帖子

哦，明白了，的确是有点稀啊，我是想提蛋白做双向电泳，这样稀释了，一定会影响裂解效果的
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ffooll[使用道具]
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发表于 2013-10-31 20:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

蛋白酶抑制剂用的比较多的就是Roche和merck，后来sigma和康成增长也很快。merck的蛋白酶抑制剂是粉剂的，1ml包装的产品经过 dH2O溶解后制成100×的贮存液，即可以用于100ml的裂解液，每个包装大约360元（据说目前正在特价的价格）。不知道罗氏和sigma的产品相比价格怎么样？
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owanaka[使用道具]
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发表于 2013-10-31 20:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

哦，我买的sigma的，1ml，592元。Roche的不是买的，是公司送的试用装，Protease Inhibitor Cocktail Tablets Complete mini EDTA-free，只有三片。
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cbou876[使用道具]
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发表于 2013-10-31 20:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
感觉有些乱，贴个图上来自己看吧，这是Roche的说明书中的。


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hustwb[使用道具]
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发表于 2013-10-31 20:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

应该是按照组织量用.即每克蛋白组织用一定量的抑制剂.
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