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标题:[未解决]ph对蛋白洗脱的影响

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
chengjia6[使用道具]
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发表于 2010-6-3 16:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

ph对蛋白洗脱的影响

洗脱蛋白是一定是在等电点处洗脱能力最强吗????

肯定不是离子交换柱，   蛋白的pi为4.7         流动相在ph8时洗脱峰面积最大，    怎么解释这种现象啊



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  • miracle   2010-6-4 10:32  可用分  +2   感谢朋友对论坛的支持！
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发表于 2010-6-3 19:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
是不是pH 8时候蛋白带负电洗脱，考虑下你用的什么体系分析下呢？
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maomi530[使用道具]
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发表于 2010-6-3 19:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
应该有很多不确定因素，可能要自己多实验几次，不同的东西根本就完全不一样的。总结属于适合就、自己的就是最好的。
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chengjia6[使用道具]
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发表于 2010-6-3 21:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
重复没得说，一样，

我就是想解释为什么，必须把机理说清楚
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LUMGR[使用道具]
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发表于 2010-6-4 00:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 chengjia6 于 2010-6-3 21:33 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
重复没得说，一样，

我就是想解释为什么，必须把机理说清楚

你的具体实验体系我们都不知道，没法帮你分析哟，只能帮你提供点思路
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sacred[使用道具]
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发表于 2010-6-4 00:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
PH4应该是在水中的等电点吧，8有可能是在这种流动相中的。你可以做个试验看看。希望有帮助
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发表于 2010-6-4 10:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这个应该跟样品的浓度和样品在此点吸收有关吧！！
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chengjia6[使用道具]
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发表于 2010-6-4 10:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
说的实验体系是  样品用水溶， 流动相是 0.05mol/l磷酸盐缓冲液

280nm
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chengjia6[使用道具]
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发表于 2010-6-4 10:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #6 sacred 的帖子

等电点还会有变化?

请教
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发表于 2010-6-4 14:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
“洗脱蛋白是一定是在等电点处洗脱能力最强"这是错误的，只能说在等电点容易保留，因为样品以中性分子的形式存在，更容易和固定相结合。至于在PH=8洗脱的峰面积最大，洗脱能力最强。是因为此时样品的离子化程度最大，越容易被洗脱，然而大于8时不好的原因是体系的离子强度大导致磷酸根和样品会竞争硅羟基，导致洗脱后峰面积小，小于8时不好的原因是样品不能充分的离子化。

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