小中大分子量270kd本来就是很难电泳转膜的，太大，上样缓冲液里SDS是必须加的，转膜缓冲液也应该有SDS,宝生物的产品目录上推荐的配方2.9g甘氨酸，5.8gtris,0.37gSDS，分子克隆上湿法转移的配方是48mmol/L Tris碱，39mmol/L甘氨酸，20%甲醇，0.0375%SDS,半干转移的配方是24mmol/L Tris碱，192mmol/L甘氨酸，20%甲醇。转移效率受SDS、pH值影响，SDS浓度不应高于0.1%,pH不低于8.0。
270KD的胶应该用8%的分离胶，甚至更低（分子克隆上200以上的推荐5%，够低吧），转膜的时候可以试试恒流300-400MA转2个小时。
