液相（HPLC)衍生化单糖组分分析的问题 - 分析百问

打印 \| 推荐 \| 订阅 \| 收藏标题:[未解决]液相（HPLC)衍生化单糖组分分析的问题
[未解决]本主题悬赏可用分 10

henshuiyifang

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发表于 2010-6-5 16:44 资料个人空间短消息加为好友

液相（HPLC)衍生化单糖组分分析的问题

希望能得到高手们的指点，我尝试用PMP衍生化单糖的方法去做液相分析，因为衍生化之后就可以用C18柱分离并用紫外检测器检测，可是结果做了N次一直不理想，无论是标品还样品出的峰都很小很小，微不可见，只有电脑才识别的出来，跟被没法往Paper上贴，恳请各位高手指点一二，以帮我爬出这泥潭。谢谢

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miracle

2010-6-6 10:36

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已有朋友回复了。

HEC_css

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发表于 2010-6-5 22:57 资料个人空间短消息加为好友

朋友，是不是没有衍生好？

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2010-6-5 22:57

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miracle	2010-6-6 10:36	可用分	+2	积极应助！辛苦了！
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huoche

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发表于 2010-6-5 23:06 资料个人空间短消息加为好友

QUOTE:

原帖由 henshuiyifang 于 2010-6-5 16:44 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
希望能得到高手们的指点，我尝试用PMP衍生化单糖的方法去做液相分析，因为衍生化之后就可以用C18柱分离并用紫外检测器检测，可是结果做了N次一直不理想，无论是标品还样品出的峰都很小很小，微不可见，只有电脑才识别的出来，跟被 ...

朋友应该是首次发提问，您目前使用的是在首页直接提问的形式，由于您未选择任何群组，因此您的问题可能，不能及时获得大家解答。
建议您先加入群组，然后再发帖，这样有助于您的问题获得专业的解答。详见cuturl('http://www.antpedia.com/faq-help/')

感谢您对分析测试百科网的支持！

henshuiyifang

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发表于 2010-6-6 10:45 资料个人空间短消息加为好友

回复 #2 HEC_css 的帖子

你好，非常感谢，不过你的梯度是怎么设定的，还有流动相是什么，你的色谱柱是C18柱吗？我用以下方法衍生化
将待测样品置于1 mL 具塞试管中,加或不加内标溶液,室温减压真空干燥;向干燥好的试管中依次
加入20μL PMP 溶液(0. 5 mol/ L 甲醇溶液) 和20μL 氢氧化钠溶液(0. 3 mol/ L) ,混匀后置于70 ℃水浴中
加热反应30 min ,取出室温放置10 min ;再加入25μL 盐酸溶液(0. 3 mol/ L) 中和,混匀后用0. 5 mL 乙酸
异戊脂萃取,涡旋3 min ,离心15 min ,小心弃去有机层,再萃取一次得到下层,加水150μL 混匀并离心15
min ,用于HPLC 分析。请您看看是否有哪里不对？

HEC_css

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发表于 2010-6-6 18:10 资料个人空间短消息加为好友

朋友，不好意思，这个我也没有做过，上面那上是文献中的，色谱条件都在上面了。梯度是从16%乙腈开始，到55分钟时为25%乙腈。色谱柱为ODS也就是反相C18柱。

以后大家还可以再交流！

猴子

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发表于 2010-6-6 21:45 资料个人空间短消息加为好友

回复 #4 henshuiyifang 的帖子

既然响应都低是不是考虑加大衍生量或尽量减少对衍生产物的稀释；另外“室温减压真空干燥”这部引起的待测样品的损失是否也应考察一下。

maomi520

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发表于 2010-6-7 09:55 资料个人空间短消息加为好友

楼主，加大进样量看看呢？

hy425

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发表于 2011-3-19 13:15 资料个人空间短消息加为好友

我也遇到和您同样的问题, 衍生化方法也和您在回贴中描述的完全一样, 我希望了解您是否已经得到解决, 望不吝赐教!
我现在想不到问题出在哪里, 开始怀疑PMP试剂是否有什么不同了.