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标题:[未解决]求助:HPLC中峰拖尾和信号问题

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
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求助:HPLC中峰拖尾和信号问题

  用HPLC测盐酸克伦特罗,按国标方法用水和甲醇做流动相,244nm做检测波长,发现标准品的峰拖尾特别严重,而且信号响应也特别低,发现可能式因为克伦特罗呈碱性,所用的又是C18柱,于是加入1%磷酸(PH=2.3),避免因为c18上的-H作用,可是发现效果也不好,拖尾照样拖,换了三根柱子都是这样的情况,很是郁闷,而且发现信号很弱很弱(在230nm时还稍微好点),这样拖尾的峰型和信号强度根本没有办法去定量。
加三乙胺好像不行,我往水中加入0.1%的TEA,PH为11左右,而所用C18柱使用PH范围是2—10之间,所以好像不行哦!
希望各位指点,谢谢!


[ 本帖最后由 我爱学习 于 2010-6-8 11:13 编辑 ]
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  • miracle   2010-6-6 11:25  可用分  +2   鼓励朋友,发起话题讨论!周末愉快! ...
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样品溶液配制有没有问题,进过样品没有,是不是也跟对照品一样?扫尾剂可以用三乙胺。检测器灯能量正常吗,波长是否准确?
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  • miracle   2010-6-6 15:18  可用分  +3   积极解答!
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楼主,先去扫个紫外,看看在哪个波段吸收度高。。。
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utek[使用道具]
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是不是保护柱很久没换了?而且保护柱还要和所用的柱子相匹配。把里面的柱芯换一下试试。如果是这个问题回我一下,呵呵,我也想知道结果。
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jeirf3uwd[使用道具]
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既然有标准了,怎么就做不出来呢,我觉得纳闷?
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加点三乙胺钝化硅羟基,不过三乙胺浓度一定要低,否者对柱子损害很大。
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wtz010[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 我爱学习 于 2010-6-6 11:20 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
  用HPLC测盐酸克伦特罗,按国标方法用水和甲醇做流动相,244nm做检测波长,发现标准品的峰拖尾特别严重,而且信号响应也特别低,发现可能式因为克伦特罗呈碱性,所用的又是C18柱,于是加入1%磷酸(PH=2.3),避免因为c18上的-H作用,可是 ...

加三乙胺试试吧  你碱性的药物  如果在流动相里加酸解离的更厉害吧, 除了扫紫外也可以把液相的DAD打开
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猴子[使用道具]
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回复 #1 我爱学习 的帖子

加酸有保留吗?既然样品呈碱性,加酸又拖尾,就试试加碱(尤其是在没有保留的情况下,需要抑制待测物解离),而且紫外吸收小也极有可能是样品呈解离态造成的。

另外建议流动相调酸性最好用三氟乙酸或甲酸,因为磷酸具有多级解离,除酸效应外可能会导入复杂的盐效应。
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iTIANMING[使用道具]
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标准上用的啥柱?换成和标准一样的试试呢
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HEC_css[使用道具]
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把你的东西走个碱性柱子
或者在样品重滴加点氨水试下
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